本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本。用純化的試劑抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入它,,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,,形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品的濃度。
試劑的使用常識(shí):
(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強(qiáng)腐蝕性,、等特性),。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,,絕不允許用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑,。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,,才可取用另一種試劑,。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,,絕不允許張冠李戴,,用完后請(qǐng)及時(shí)將瓶放回原處,以免遺忘,,帶來不便,。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)(怕產(chǎn)生原試劑的再次污染)。
標(biāo)本要求:
1.小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物(Iba-1)ELISA試劑盒不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
需要而未提供的試劑和器材:
37℃恒溫箱
標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
精密移液器及一次性吸頭
蒸餾水
一次性試管
吸水紙