儀器和試劑:日本島津公司Le-10A液相色譜;SPD-10A紫外-可見分光度檢測器,;色譜柱C18Shim-pack VP-ODS 150×4.6mm,維生素D3對照品(含量≧99.9%),,甲醇為色譜純,磷酸為分析純,,水為二重蒸餾水,。對照品儲備液為1.000mg/ml的維生素D3甲醇溶液。方法和結(jié)果:柱溫為室溫,,流速為1ml/min,進樣量為10ul,檢測波長254nm,,同一批次樣品,多次檢測(見表1),。
表1 不同流動相配比時,,維生素D3的含量測定
液相色譜是以液體作為流動相的一種色譜分離技術(shù)。它利用流動相液體將被分離混合物帶入色譜柱中,,根據(jù)各組分在固定相及流動相中吸附能力,、分配系數(shù)、離子交換作用或分子大小的差異進行分離,。液相色譜并不受樣品的揮發(fā)度和穩(wěn)定性的限制,且非常適合于分離生物藥品的大分子,、離子型化合物、不穩(wěn)定的天ran產(chǎn)物以及其他各種高分子量的或不穩(wěn)定的化合物,。對于很難分離的樣品,用液相色譜常常比用氣相色譜容易完成,被廣泛應(yīng)用于石油和化工等領(lǐng)域,。目前研究和使用較多的液相色譜主要有高液相色譜法(HPLC)。