在液相色譜柱的使用過(guò)程中,,大家總是碰到這樣那樣的問(wèn)題。今天給大家介紹幾個(gè)常見的問(wèn)題及解決方法,。
1.使用一段時(shí)間后柱壓過(guò)高:
解決方法:
首先查看是否HPLC系統(tǒng)原因,,排除系統(tǒng)原因后,原因基本是由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中雜質(zhì)在柱中的累積,。盡量完善操作條件,,做完樣品后要及時(shí)沖洗干凈,如緩沖鹽的流動(dòng)相一定要用高比例的水溶液(如,,90%)沖洗后再用有機(jī)相保存,。
2.篩板堵塞與柱頭塌陷:
解決方法:
如確定是色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,,或者卸下色譜柱頭,,小心取下篩板,,用5%左右的硝酸溶液超聲處理20分鐘左右,再用純水超聲20分鐘左右,,重新裝入色譜柱,。
3.色譜柱頭的填料被樣品污染:
解決方法:
如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,,挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,,用相同的柱填料重新填入,仔細(xì)修復(fù)后,,重新安裝上柱頭螺絲,。
4.色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑,形成結(jié)晶析出:
解決方法:
如確定是鹽結(jié)晶,,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,,再換高濃度甲醇。
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