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細胞轉(zhuǎn)染技術的兩個分類介紹
閱讀：444 發(fā)布時間：2023-12-25
細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,，RNA等導入真核細胞的技術,。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具,。在研究基因功能,、調(diào)控基因表達,、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學試驗中,，其應用越來越廣泛。
細胞轉(zhuǎn)染是指將外源遺傳物質(zhì)（DNA或RNA）導入真核細胞的技術,。細胞轉(zhuǎn)染技術可分為兩大類,，一類是瞬時轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,。
瞬時轉(zhuǎn)染：外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,，因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達,，但持續(xù)時間只有幾天（數(shù)天內(nèi)大部分外源性 DNA 會在核酸酶作用下降解或被細胞分裂稀釋,，一周后便無法再檢出）。使用超螺旋質(zhì)粒 DNA 進行瞬時轉(zhuǎn)染的效率高,，因為其能被細胞更高效地攝取,。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：外源性DNA可以整合至細胞基因組中，或者作為游離型質(zhì)粒存在,，并可傳遞至轉(zhuǎn)染細胞的子代,。但通常只有單個或幾個拷貝的外源性DNA整合至穩(wěn)定轉(zhuǎn)染基因組中，因此穩(wěn)定轉(zhuǎn)染基因的表達水平一般低于瞬時轉(zhuǎn)染基因的表達水平,。由于外源性DNA穩(wěn)定整合至基因組的概率很低,，因此通常在用于轉(zhuǎn)染的DNA構建體中納入可篩選標記物（如對各種篩選藥物產(chǎn)生抗性的基因，或是可對待轉(zhuǎn)染細胞系有缺陷的必需基因進行補償?shù)幕颍?，然后在短暫的恢復期后對細胞施加適當?shù)暮Y選壓力,。