羅丹明標記L-半胱氨酸(Rhodamine B-L-Cysteine,,簡稱RB-L-Cysteine)是一種通過化學方法將羅丹明分子與L-半胱氨酸分子連接而成的復合物,。以下是對其的詳細介紹:
結構:羅丹明標記L-半胱氨酸由羅丹明B的熒光基團和L-半胱氨酸的硫醇基團通過共價鍵連接而成,。
性質:
高熒光強度:羅丹明B是一種具有高熒光量子產率的染料,,在適當的激發(fā)波長下發(fā)出明亮的熒光,,使其在生物成像中易于檢測,。
生物相容性:L-半胱氨酸是一種天然存在的氨基酸,具有良好的生物相容性,,適合于生物醫(yī)學研究,。
反應性:L-半胱氨酸的硫氨基(-SH)可以與羅丹明B的活化官能團(如氨基或羧基)發(fā)生反應,從而實現有效的標記,。
可控性:通過調整反應條件,,可以控制標記的數量和反應的選擇性,。
生物成像:羅丹明標記L-半胱氨酸可以作為熒光探針,,用于細胞或組織的生物成像研究,。通過熒光顯微鏡觀察熒光信號,可以實時監(jiān)測L-半胱氨酸在細胞或組織中的分布和動態(tài)變化,。
藥物篩選:在藥物篩選過程中,,羅丹明標記L-半胱氨酸可以作為靶標分子,用于評估藥物與靶標的相互作用,。通過檢測熒光信號的變化,,可以篩選出具有潛在活性的藥物候選物。
生物傳感:羅丹明標記L-半胱氨酸還可用于構建生物傳感器,,用于檢測生物分子或離子的濃度變化,。這種傳感器具有靈敏度高、響應速度快,、操作簡便等優(yōu)點,。
制備:使用化學合成或商業(yè)購買的純L-半胱氨酸,,并溶解在適當的緩沖溶液中(如PBS或水),。羅丹明B可以通過反應生成其NHS酯或其他活化形式,使其與L-半胱氨酸中的氨基反應,。將活化的羅丹明B與L-半胱氨酸混合,,在適當的緩沖液(如PBS,pH 7.4)中進行反應,。通常在室溫或稍低的溫度下反應2~4小時,,以確保標記效率。反應完成后,,通過透析,、凝膠滲透色譜(GPC)或高效液相色譜(HPLC)等方法去除未反應的羅丹明B和其他雜質,以獲得純化的羅丹明B-L-半胱氨酸標記物,。
保存:為確保其穩(wěn)定性和活性,,羅丹明標記L-半胱氨酸應嚴格按照推薦的儲存條件進行保存,避免光照,、高溫和潮濕等不利因素,。通常建議冷藏保存,如-20℃,。
在使用過程中,應注意羅丹明標記L-半胱氨酸的濃度和儲存條件,,以避免熒光猝滅或降解,。
羅丹明標記L-半胱氨酸僅用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途。
在處理和使用過程中,,應遵守相關的安全操作規(guī)程,,避免與皮膚、眼睛等直接接觸,。如有不慎接觸,,應立即用大量清水沖洗并就醫(yī)。
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