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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 kit |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CS-20003-100 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品介紹
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基是為在體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)人單核細(xì)胞向成熟CD1c+cDC2樹突狀細(xì)胞（DC）亞群分化發(fā)育而專門設(shè)計的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可在7天內(nèi)誘導(dǎo)人cDC2（CD11c+ HLA-DR+ CD1c+CD14-）亞群產(chǎn)生,，是研究人cDC2分化發(fā)育和功能,、以及產(chǎn)生人DC疫苗的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基
產(chǎn)品特點
針對人單核細(xì)胞向成熟CD1c+cDC2樹突狀細(xì)胞（DC）亞群分化發(fā)育而設(shè)計,，
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱 | Catlog# | 規(guī)格 | 儲存條件 |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 | CS-20003-100 | 1 kit | |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | CS-20003-B | 100ml | 4℃ |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞分化補充因子 | CS-20003-DES | 0.5ml | -20℃ |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟補充因子 | CS-20003-MTS | 0.5ml | -20℃ |
預(yù)篩選樹突狀細(xì)胞專用胎牛血清 | CS-DCF-10 | 10ml | -20℃ |
其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑
人CD14+單核細(xì)胞磁珠分選試劑
*培養(yǎng)基配制
(在無菌生物安全柜中,，開展以下操作)
1.在4度冰箱解凍補充因子和胎牛血清，混勻后使用,。
注：解凍后的補充因子和血清可放置于4 oC冰箱,，在1個月內(nèi)使用,；或者分裝至合適體積后，保存于-20℃冰箱,，不可反復(fù)凍融,！2.分化培養(yǎng)基配制：將1體積的分化補充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻,，得到人cDC2樹突狀細(xì)胞分化培養(yǎng)基,。如取100ul補充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類推,。
成熟培養(yǎng)基配制：將1體積的成熟補充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,，充分混勻，得到人cDC2樹突狀細(xì)胞成熟培養(yǎng)基,。
注：配好的*培養(yǎng)基請于4℃保存,，且于1個月內(nèi)使用完畢。使用說明
（請詳細(xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實驗）
1.使用磁珠分選人外周血單個核細(xì)胞中單核細(xì)胞（參考所使用試劑盒的說明書）,，計數(shù),。
注：健康供體每1ml外周血中約含有1-3*10^5單核細(xì)胞。2.D0：使用分化培養(yǎng)基重懸單核細(xì)胞,，調(diào)整細(xì)胞密度至1*10^6/ml,，按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板：
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | 單核細(xì)胞數(shù)/孔 |
24孔板 | 1.0ml | 1.0*10^6 |
6孔板 | 4.0ml | 4.0*10^6 |
3.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱，37℃,，5%CO2,，靜置培養(yǎng)。
4.D3：半量換液,。小心貼培養(yǎng)板側(cè)壁用槍尖吸走1/2體積舊培養(yǎng)基,，補充加入新鮮分化培養(yǎng)基至初始培養(yǎng)體積（步驟2表格）。
注：*培養(yǎng)基請恢復(fù)至室溫后使用,，減少對細(xì)胞的刺激,。5.D5：誘導(dǎo)成熟。小心貼培養(yǎng)板側(cè)壁用槍尖吸走1/2體積舊培養(yǎng)基,，補充加入新鮮成熟培養(yǎng)基至初始培養(yǎng)體積（步驟2表格）,。
6.D7：輕輕吹打細(xì)胞，收集懸浮細(xì)胞,，即為分化成熟的人CD1c+cDC2,，可進(jìn)行后續(xù)操作和分析。
注：如需研究特定刺激對DC的影響,，可提前加入相應(yīng)刺激,，待D7收集細(xì)胞進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)展示
圖：人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)鑒定。磁珠分選的人單核細(xì)胞按照上述說明培養(yǎng),，至第6天時,，加入100ng/ml LPS刺激，第7天收集懸浮細(xì)胞進(jìn)行流式染色分析,。
