供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 kit |
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貨號 | CS-20001-100 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡介
詳細介紹
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞培養(yǎng)試劑盒是為在體外培養(yǎng)和誘導小鼠造血前體細胞向成熟樹突狀細胞(DC)亞群分化發(fā)育而專門設計的一款含血清培養(yǎng)基套裝,。該培養(yǎng)試劑盒可在10天內(nèi)同時誘導不同DC亞群產(chǎn)生,主要包括傳統(tǒng)型cDC2(CD11c+ MHCII+ CD11b+B220-)和漿細胞樣pDC(CD11cmod MHCIIlow B220+PDCA1+),,是研究不同亞群DC分化發(fā)育和功能,、以及產(chǎn)生小鼠DC疫苗的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。
產(chǎn)品特點
針對培養(yǎng)小鼠成熟樹突狀細胞而設計
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱 | Cat log # | 規(guī)格 | 儲存條件 |
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞培養(yǎng)試劑盒 | CS-20001-100 | 1 kit | |
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞基礎培養(yǎng)基 | CS-20001-B | 100ml | 4℃ |
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞補充因子 | CS-20001-S | 1ml | -20℃ |
預篩選樹突狀細胞專用胎牛血清 | CS-DCF-10 | 10ml | -20℃ |
*培養(yǎng)基配制
(在無菌生物安全柜中,,開展以下操作)
1.在4℃冰箱解凍補充因子和胎牛血清,,混勻后使用。
注:解凍后的補充因子和血清可放置于4℃冰箱,,在1個月內(nèi)使用,;或者分裝至合適體積后,,保存于-20℃冰箱,不可反復凍融,!2.將1體積的補充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎培養(yǎng)基中,,充分混勻,得到小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞*培養(yǎng)基,。如取100ul補充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎培養(yǎng)基,,以此類推。
注:配好的*培養(yǎng)基請于4℃保存,,且于1個月內(nèi)使用完畢,。使用說明
(請詳細閱讀使用說明后再開始相關實驗)
1.使用淋巴細胞分離液從小鼠骨髓總細胞中分離得到骨髓單個核細胞(BM-MNC),計數(shù),。
2.D0:使用*培養(yǎng)基重懸BM-MNC,,調(diào)整細胞密度至1.5*10^6/ml,按照如下表格所示將細胞鋪于培養(yǎng)板:
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | BM-MNC細胞數(shù)/孔 |
24孔板 | 1ml | 1.5*10^6 |
6孔板 | 4ml | 6*10^6 |
3.將培養(yǎng)板置于細胞培養(yǎng)箱,,37℃,,5%CO2,靜置培養(yǎng),。
4.D3:半量換液,。小心從原來的培養(yǎng)板孔中取出一半原有培養(yǎng)基,加入等量新鮮*培養(yǎng)基,。
注:*培養(yǎng)基請恢復至室溫后使用,,減少對細胞的刺激;考慮到培養(yǎng)過程中的液體揮發(fā),,加入新鮮*培養(yǎng)基時,,可考慮多加10%體積*培養(yǎng)基。
5.D6:半量換液,。同第4步,。
6.D10:輕輕吹打細胞,收集懸浮細胞,,即為分化成熟的小鼠穩(wěn)態(tài)DC,,可進行后續(xù)操作和分析。
注:如需研究特定刺激對DC的影響,,可提前加入相應刺激,,待D10收集細胞進行分析。數(shù)據(jù)展示
圖:小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞亞群分布,。取4-6周齡雄性C57BL/6小鼠BM-MNC按照上述說明培養(yǎng)至第10天,,收集懸浮細胞檢測DC產(chǎn)生和亞群分布。