供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg |
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貨號 | GE-20005 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡介
詳細介紹
?載體大小:4.5 kb-11.5 kb
?轉染方式:直接轉染或通過病毒轉染
?兩種標記可選:mCherry/GFP等熒光標記 Puro/Zeocin/Neomycin等藥物標記
1. CRISPR KI donor載體
產(chǎn)品介紹
CRISPR KI donor載體是由pUC19質粒改造而來,??芍苯愚D染或通過電轉導入細胞。該質粒含有eGFP及PuroR篩選基因插入元件,,元件兩側含有多個酶切位點,,可供插入knock in所需的左右同源臂。經(jīng)過改造的載體可與spCas9及sgRNA共同作用,,達到在特定基因組位點插入含eGFP和Puro抗性基因的目的,。
本產(chǎn)品通過冰盒運輸,到貨后請立即放入-20℃冰箱保存,。產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱 | CRISPR KI donor 載體 |
載體大小 | 4.5 kb |
左側克隆位點 | Hind Ⅲ,、Sph Ⅰ、Sal Ⅰ |
右側克隆位點 | Mlu Ⅰ,、Kpn Ⅰ,、EcoR Ⅰ |
產(chǎn)品規(guī)格 | 10 μg/支 |
載體示意圖
2. sgRNA-Puro/mCherry病毒載體等
產(chǎn)品介紹
CRISPR/Cas9 sgRNA病毒載體是慢病毒系統(tǒng)質粒,可直接轉染或通過包裝病毒感染細胞,。該質粒含有gRNA骨架結構及兩種標記以篩選標記基因,,客戶自行插入靶基因的特定sgRNA序列后,與spCas9共同作用,,達到基因編輯的目的。
本產(chǎn)品通過冰盒運輸,,到貨后請立即放入-20℃冰箱保存,。CRISPR/Cas9 sgRNA質粒載體
產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 載體大小 | sgRNA克隆位點 | Esp3 Ⅰ 酶切后片段大小 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
sgRNA-Puro/mCherry病毒載體 | GE-20005-PC | 11.5 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+9.5 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-mCherry病毒載體 | GE-20005-C | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-GFP病毒載體 | GE-20005-G | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Zeocin病毒載體 | GE-20005-Z | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Neomycin病毒載體 | GE-20005-N | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Puro病毒載體 | GE-20005-P | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Puro/GFP病毒載體 | GE-20005-PG | 11.5 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+9.5 kb | 10 μg/支 |
使用說明
(請詳細閱讀使用說明后再開始相關實驗)
1.從-20℃冰箱中取出CRISPR/Cas9 sgRNA病毒載體,4℃融化2.配置酶切反應液
3.37℃,,酶切0.5 h
4.終止酶切反應液,,將反應液加到1%瓊脂糖凝膠孔,跑膠30 min,,回收片段,,與退火獲得的sgRNA靶向序列做連接反應
5.連接產(chǎn)物通過轉化獲得陽性克隆,測序成功后經(jīng)過質粒抽提即可使用