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產(chǎn)品簡介
ReadyPrep 試劑盒所需的樣品量較少（Z多2ml）,，不需要額外的設(shè)備,；因而是一種既節(jié)省時間，又節(jié)省投資的好方法,。
詳細介紹
ReadyPrep 產(chǎn)品線包含一系列2-D 樣品制備試劑盒,，不僅適用于通用樣品（總蛋白）處理,，而且可以將復雜樣品按特定方法分級。
處理通用樣品的試劑盒包括總蛋白抽提和蛋白凈化（clean- up）,。
樣品分級試劑盒可用來降低樣品復雜程度,，同時有助于低豐度蛋白的富集和鑒定。這類試劑盒又分為兩種,，一種是基于蛋白不同的亞細胞定位來分離,，另一 種是對細胞總蛋白進行分級，從而適和于總蛋白質(zhì)組分析,。下面的流程圖將幫您確定哪種試劑盒對您更適合,。
具體用途
ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒
ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒可去除蛋白樣品中的去垢劑、鹽分,、小肽,、之類和酚類化合物。這些物質(zhì)會干擾雙向電泳,。本試劑盒含有不受去垢劑,、離液劑或其它實驗中常用試劑干擾的沉淀試劑，可充分沉淀樣品蛋白,，并保證了蛋白樣品的回收效率和濃度,。
ReadyPrep還原/烷化試劑盒
ReadyPrep還原/烷化試劑盒首先將半胱氨酸殘基之間的二硫鍵還原，然后將還原出來的巰基烷化,，使得這些基團*保持還原狀態(tài),。這樣做有助于 防止假蛋白點的出現(xiàn)并能讓IPG膠條中更多的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到第二向的SDS-PAGE膠中（Candiano et al. 2002） 。本試劑盒對分析堿性蛋白質(zhì)特別有效,。因為膠條堿性部位的DTT容易電離,，在電場作用下遷移出IPG膠條，從而使膠條中DTT減少,，蛋白質(zhì)二硫鍵重新形成 （Herbert et al. 1998） ,。絕大多數(shù)生物含有較多數(shù)量的堿性蛋白，這類蛋白的pI值高于pH 7 （Wildgruber et al. 2000）,。
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （總蛋白）
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （總蛋白） 是一種操作簡單,、快捷、重復性好的試劑盒,，用來抽提適合于雙向電泳的細胞全蛋白,。試劑盒中離液性*的抽提溶液含有兼性去垢劑ASB-14，從而使該溶液能溶解各種細胞的全蛋白,。
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒 （膜I）
本試劑盒是利用Triton X-114在一定溫度下可與水相分層的原理將蛋白分離 （Bordier 1981, Santoni et al. 2000）。經(jīng)過zui后一步的離心步驟,，溶液被分級成上層的水相和下層的高去垢劑相,。此外還有一些難溶的沉淀，這些沉淀主要是更加復雜的膜蛋白。進入上下兩 相的蛋白再用ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒（含在本試劑盒中）凈化,，以去除抽提過程中混入的可能干擾IEF的物質(zhì),。
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒 （膜II）
膜II試劑盒做為其它膜蛋白分離試劑盒的補充，是專門為有效分離較為復雜的膜蛋白而優(yōu)化的,。抽提的過程用到了碳酸鈉和超速離心機,。試劑盒中的2-D水化/上樣緩沖液含有強離液性的兼性去垢劑ASB-14。
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒（信號）
絕大多數(shù)細胞的胞漿膜都有富含神經(jīng)鞘磷脂和膽固醇的微區(qū)域（酯筏）,。與這些脂筏相的蛋白往往是參與物質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)運或信號轉(zhuǎn)導的蛋白質(zhì),。這類蛋白包 括GPI錨訂蛋白、caveolin,、caveolae （caveolin-associated proteins）,、酰化酪氨酸激酶,、G蛋白異三聚體,，以及一些含跨膜結(jié)構(gòu)域的蛋白 （Simons and Ikonen 1997, Brown and Rose 1992, Parton and Simons 1995, Anderson et al. 1992） 。與胞膜當中這些富含酯類的微區(qū)域相結(jié)合的蛋白質(zhì)在4°C Triton X-100的溶液中難溶,。ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒（信號） 利用這一原理將信號蛋白有選擇性地加以回收,。
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒（胞漿/核）
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒（胞漿/核）使用一種專門配制的緩沖液和差速離心將細胞核完整地分離出來（Dignam et al. 1983, Zerivitz and Akusjarvi 1989）。本試劑盒包含一種強離液性的緩沖液,，可有效溶解膜蛋白,，并可直接用于雙向電泳分離。如要對胞漿組分進行分析可以將蛋白樣品先用試劑盒中帶的 ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒處理,。
ReadyPrep 順序抽提試劑盒
ReadyPrep 順序抽提試劑盒是為全蛋白質(zhì)組分析而設(shè)計的,。本試劑盒將初始蛋白樣品根據(jù)溶解性的不同分成三個組分。當?shù)鞍椎膩喖毎ㄎ徊荒艽_定時,，本試劑盒還可以用來搜 尋特定的蛋白,。 依照溶液溶蛋白能力的增加將蛋白樣品進行順序抽提可以溶解更多的蛋白，從而使蛋白質(zhì)組的信息更全面 （Molloy et al. 1998）,。
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （可溶/不可溶）
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （可溶/不可溶） 可將細胞全部蛋白分為兩個組分——以親水性蛋白為主的可溶性組分和以疏水性蛋白為主的不可溶組分,。這種簡單的分級方法可有效降低樣品的復雜性，提高低豐度蛋白的檢測效率,，從而在總體上改善總蛋白質(zhì)組的分離效果,。
試劑盒中部分試劑介紹
ReadyPrep 順序抽提試劑盒reagent 3—該預混的樣品緩沖液含硫脲和去垢劑SB3-10，可提高難溶蛋白質(zhì)的溶解效果,。使用前加入TBP或DTT可溶解極難溶的蛋白,。更多信息請參考資料＃2495。
ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒水化/樣品緩沖液—該標準配方適合許多蛋白樣品,；經(jīng)性能測試的緩沖液能方便地用于制備樣品,。
ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒平衡緩沖液I—緩沖液預混有DTT,，用于DTT/ 碘乙酰胺烷化方法的*個平衡步驟。
ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒平衡緩沖液II—在緩沖液中加入碘乙酰胺,，用于DTT/ 碘乙酰胺烷化方法的第二個平衡步驟,。加入TBP 和丙烯酰胺也可用于單步TBP/ 丙烯酰胺烷化方法。
E. coli 蛋白樣品—該蛋白樣品經(jīng)性能測試,，與ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒的水化/樣品緩沖液配合使用時,，能提供穩(wěn)定的電泳圖譜。在使用更復雜的實驗樣品前,，可以用這個樣品作為對照來驗證你的雙向電泳系統(tǒng)和實驗操作,。
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