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培養(yǎng)基的配置
閱讀：1552 發(fā)布時(shí)間：2015-5-28
摘要: 培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),。培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源,、碳源、氮源,、礦質(zhì)元素,、水和生長(zhǎng)因素，但不同營(yíng)養(yǎng)類型,、不同種類的...
培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源,、碳源,、氮源、礦質(zhì)元素,、水和生長(zhǎng)因素,，但不同營(yíng)養(yǎng)類型、不同種類的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的要求又有很大差異,。培養(yǎng)基還需具有適宜的pH值,、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓,。
以下為培養(yǎng)基的配置的常規(guī)方法,，如配方中有特殊規(guī)定或要求，以配方為依據(jù),。
1. 根據(jù)配方,，計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分用量。一般可用電子天平稱量,，遵循由含量低到含量高的稱量原則,。針對(duì)含量少的成分,，可按比例配成高濃度溶液，再按所需量用移液管吸取,。將稱好的成分放入相應(yīng)玻璃容器中,。
2. 加入所需量的水（建議使用純化水），加熱使其*溶解,。液體培養(yǎng)基建議使用
3. 若配制固體培養(yǎng)基,，則稱取1.2～2.0％的瓊脂放進(jìn)已稱量好的培養(yǎng)基中，繼續(xù)加熱至瓊脂全部溶解,。加熱中隨時(shí)攪拌,，防止溢出或糊底。燒糊的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)破壞,，并產(chǎn)生有毒物質(zhì),，不宜再用。
4. 待培養(yǎng)基稍冷卻后,，按配方要求調(diào)整pH值,。用10％NaOH溶液（或10％HCl溶液）調(diào)整所配培養(yǎng)基的pH。加堿（或酸）溶液時(shí),，應(yīng)邊滴加邊攪拌,，直至zui后調(diào)至要求的pH值。
5. 配好的培養(yǎng)基,，根據(jù)需要趁熱分裝至試管或錐形瓶中,。裝瓶量一般為瓶容量的1/3～1/2；裝試管一般為試管高度的1/5～1/4,，以免滅菌時(shí)培養(yǎng)基上溢,。
6. 用膠塞塞住管口或瓶口。膠塞既有利于通氣,，又有濾菌作用,，故松緊、大小應(yīng)適當(dāng),，以免使用時(shí)影響操作,。
7. 應(yīng)按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時(shí)進(jìn)行滅菌。普通培養(yǎng)基采用121℃,、15min高壓濕熱滅菌法,，以保證滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成份。
8. 滅菌后取出的固體培養(yǎng)基,，根據(jù)需要可將試管立即斜放,，冷凝后即成斜面培養(yǎng)基，斜面長(zhǎng)度一般以不超過(guò)試管長(zhǎng)度的1/2為宜,；半固體培養(yǎng)基滅菌后,，垂直冷凝成半固體深層瓊脂,。錐形瓶中的培養(yǎng)基，冷卻到45～50℃,，倒進(jìn)無(wú)菌培養(yǎng)皿中,，冷凝后即制成平板培養(yǎng)基，可用于菌種的分離,、鑒定等,。液體培養(yǎng)基冷卻后可直接根據(jù)需要接進(jìn)菌種。
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