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培養(yǎng)基的配置
閱讀:1655 發(fā)布時間:2015-5-28摘要: 培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì),。培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源、碳源,、氮源,、礦質(zhì)元素、水和生長因素,,但不同營養(yǎng)類型,、不同種類的...
培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源,、碳源,、氮源、礦質(zhì)元素,、水和生長因素,,但不同營養(yǎng)類型、不同種類的微生物對營養(yǎng)元素的要求又有很大差異,。培養(yǎng)基還需具有適宜的pH值,、一定的緩沖能力,、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。
以下為培養(yǎng)基的配置的常規(guī)方法,,如配方中有特殊規(guī)定或要求,,以配方為依據(jù)。
1. 根據(jù)配方,,計算各種營養(yǎng)成分用量,。一般可用電子天平稱量,遵循由含量低到含量高的稱量原則,。針對含量少的成分,,可按比例配成高濃度溶液,再按所需量用移液管吸取,。將稱好的成分放入相應玻璃容器中,。
2. 加入所需量的水(建議使用純化水),加熱使其*溶解,。液體培養(yǎng)基建議使用
3. 若配制固體培養(yǎng)基,,則稱取1.2~2.0%的瓊脂放進已稱量好的培養(yǎng)基中,繼續(xù)加熱至瓊脂全部溶解,。加熱中隨時攪拌,,防止溢出或糊底。燒糊的培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)破壞,,并產(chǎn)生有毒物質(zhì),,不宜再用。
4. 待培養(yǎng)基稍冷卻后,,按配方要求調(diào)整pH值,。用10%NaOH溶液(或10%HCl溶液)調(diào)整所配培養(yǎng)基的pH。加堿(或酸)溶液時,,應邊滴加邊攪拌,,直至zui后調(diào)至要求的pH值,。
5. 配好的培養(yǎng)基,,根據(jù)需要趁熱分裝至試管或錐形瓶中。裝瓶量一般為瓶容量的1/3~1/2,;裝試管一般為試管高度的1/5~1/4,,以免滅菌時培養(yǎng)基上溢。
6. 用膠塞塞住管口或瓶口,。膠塞既有利于通氣,,又有濾菌作用,故松緊,、大小應適當,,以免使用時影響操作,。
7. 應按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時進行滅菌。普通培養(yǎng)基采用121℃,、15min高壓濕熱滅菌法,,以保證滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成份。
8. 滅菌后取出的固體培養(yǎng)基,,根據(jù)需要可將試管立即斜放,,冷凝后即成斜面培養(yǎng)基,斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜,;半固體培養(yǎng)基滅菌后,,垂直冷凝成半固體深層瓊脂。錐形瓶中的培養(yǎng)基,,冷卻到45~50℃,,倒進無菌培養(yǎng)皿中,冷凝后即制成平板培養(yǎng)基,,可用于菌種的分離,、鑒定等。液體培養(yǎng)基冷卻后可直接根據(jù)需要接進菌種,。
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