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越來越多的證據(jù)表明，循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)中的micrornA具有診斷和預(yù)后的潛力,。然而,，檢測(cè)卻并非易事。近日,，西班牙的研究人員在《Science Reports》上介紹了一種方法,，能利用原位雜交檢測(cè)這種小的非編碼RNA。

CTC是從原發(fā)性腫瘤脫落,，然后進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)的一種細(xì)胞,。它們到達(dá)其他的組織或器官，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移,。鑒于近年來CTC檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步,，研究人員能夠利用這些上皮細(xì)胞來監(jiān)測(cè)癌癥進(jìn)展，并跟蹤患者對(duì)治療的反應(yīng),。

盡管如此,，大多數(shù)CTC分析的靈敏度較低。據(jù)GENYO研究團(tuán)隊(duì)介紹,，這主要是因?yàn)橹挥猩倭康纳掀?biāo)志物可用來鑒定和分離全血中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞,，通常是上皮細(xì)胞粘附分子(EpCAM)和細(xì)胞角蛋白(CK)。然而，這些上皮細(xì)胞也可能來自其他上皮組織,，而并非腫瘤。

讓事情更加復(fù)雜的是,，數(shù)據(jù)表明存在一部分CTC,，不表達(dá)EpCAM或CK。相反,，這些細(xì)胞表現(xiàn)出上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的特征,。這個(gè)過程與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)，其中上皮細(xì)胞呈現(xiàn)出間質(zhì)特征,，促進(jìn)遷移,、入侵和抗凋亡。

基于這些原因,，探索CTC中miRNA的生物標(biāo)志物潛力受到了限制,。為了解決這個(gè)問題，GENYO的研究人員開發(fā)出一種稱為MishCTC的方法,，將原位雜交方法以及基于CK表達(dá)的免疫磁性選擇和免疫細(xì)胞化學(xué)相結(jié)合,，利用鎖核酸(LNA)探針來檢測(cè)miRNA。

為了驗(yàn)證這種技術(shù),，研究人員選擇了miR-21,，這種miRNA靶定多個(gè)腫瘤抑制基因，而且在癌細(xì)胞中表達(dá)而不在造血細(xì)胞中表達(dá),，因此是檢測(cè)CTC的理想標(biāo)志物,。

他們獲得了25例轉(zhuǎn)移性癌癥患者的外周血樣本，并利用MishCTC方法開展了分析,。在這25個(gè)樣本中,，11個(gè)樣本含有表達(dá)CK和miR-21的CTC。對(duì)于CK表達(dá)丟失的EMT誘導(dǎo)的上皮腫瘤細(xì)胞系(MCF-7),，MishCTC技術(shù)也成功追蹤了miR-21的表達(dá),，表明miR-21可能是檢測(cè)EMT表型的CTC的一個(gè)很好的標(biāo)志物。

據(jù)作者介紹,，這些數(shù)據(jù)*次證明了原位雜交方法可以用于CTC中miRNA的鑒定,。他們目前正在招募大批的癌癥患者，以便根據(jù)miRNA的表達(dá)來研究CTC的異質(zhì)性,。

來自生物幫

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