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Anti-Flag 磁珠

MCE 國際站：Anti-Flag Magnetic Beads (1 μm)

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K0207A

產(chǎn)品活性：MCE Anti-Flag 磁珠 (1 μm) 可用于細菌和哺乳動物細胞裂解物以及體外表達系統(tǒng)中 Flag 標記蛋白的免疫沉淀（IP）實驗,，也可用于免疫共沉淀 (Co-IP) 和小量的蛋白質(zhì)純化實驗,。

操作流程：1. 抗原樣品制備根據(jù)不同的樣品選擇合適的處理方法2. 磁珠預(yù)處理混懸 Anti-Flag 磁珠 (1 μm) ，取 10 μL 磁珠,，置于 1.5 mL EP 管中,，加入 500 μL 洗滌緩沖液，充分混懸,，置于磁力架上磁性分離,，棄上清。重復(fù)以上洗滌步驟 2 次,。3. 樣品的結(jié)合在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 細胞裂解液,，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育,，室溫孵育 2 小時或者 4℃ 條件下孵育過夜,。置于磁力架上磁性分離，棄上清,。注： 結(jié)合過程中,，磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象,，不會影響實驗結(jié)果。4. 洗滌在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 洗滌緩沖液,，充分混懸磁珠,，磁性分離，棄上清,。重復(fù)以上洗滌步驟 3 次,，直到洗滌后的上清液中 OD280 小于0.05 為止,。注： 如上清液的 OD280 大于 0.05，適當增加洗滌次數(shù)即可,。5. 洗脫本說明書提供三種 Flag 標簽蛋白洗脫方案,，操作者可以根據(jù)后期檢測的需要選擇不同的洗脫方案。1) 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測,。步驟：分離磁珠,，棄上清，向磁珠中加入 50 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻,，95°C 加熱 5 分鐘。分離磁珠,，收集上清至新的 EP 管,，進行 SDS-PAGE 檢測。2) 酸性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有生物活性,，可用于后期功能分析,。步驟：分離磁珠，棄上清,，向磁珠中加入 50 μL 的洗脫緩沖液 A 混合均勻,，室溫孵育 10 分鐘。分離磁珠,，收集上清至新的 EP 管,，按每 50 μL 洗脫液加入 25 μL 中和緩沖液的比例加入中和緩沖液，將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性,，樣品用于后期功能分析,。3) 競爭性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有生物活性，可用于后期功能分析,。步驟：分離磁珠,，棄上清，向磁珠中加入 3-5 倍磁珠體積的洗脫緩沖液 B 混合均勻,，室溫孵育 1 小時或者 4°C 條件下孵育 1-2 小時,。分離磁珠，收集上清至新的 EP 管,，即為目的蛋白,，樣品用于后期功能分析。

熱-銷產(chǎn)品：Guaiol  | Inosinic acid  | Taletrectinib  | Ecliptasaponin A  | Tenofovir Disoproxil

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