Reverse Transcriptase
MCE 國際站:Reverse Transcriptase
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件: -20°C,,1 年
簡介:Reverse Transcriptase是通過基因重組技術(shù)克隆表達(dá)M-MuLV的缺失突變型RNase H-的反轉(zhuǎn)錄酶。
概述:Reverse Transcriptase是通過基因重組技術(shù)克隆表達(dá)M-MuLV的缺失突變型RNase H-的反轉(zhuǎn)錄酶,。一般的野生型M-MuLV(Moloney Murine Leukemia Virus)具有以下幾種活性:1)依賴于RNA的DNA聚合酶活性,;2)依賴于DNA的DNA聚合酶活性;3)RNase H活性,。由于RNase H能夠催化降解DNA/RNA雜合體中的RNA,,因此在cDNA第一條鏈的合成反應(yīng)中可能會(huì)降解RNA/DNA雜合體中的模板RNA。本酶的RNase H活性缺失,,延伸能力強(qiáng),,可用于較長的cDNA合成,高比例的全長cDNA文庫的構(gòu)建以及Real Time RT-PCR反應(yīng)等,。
描述:
該酶缺乏RNase H活性,,延伸能力強(qiáng),可用于較長cDNA合成,、高比例全長cDNA文庫構(gòu)建,、Real Time RT-PCR反應(yīng)等。
操作說明:cDNA第一鏈合成反應(yīng)體系1) 試劑融化后,,將試劑盒中各組分混勻并稍微離心后置于冰上,。2) 按順序加入以下反應(yīng)物:3) 如果RNA模板GC含量高或者含有二級(jí)結(jié)構(gòu),可先將RNA模板和Water(RNase-Free)混勻后,,65℃孵育5min,,冰上冷卻,再加入其它組分,。4) 3) 輕輕混勻,,離心。42℃孵育15-30min,。如果RNA模板中不含poly A結(jié)構(gòu),,25℃先孵育5min,隨后42℃孵育15-30min,。反應(yīng)產(chǎn)物可直接用于PCR,,如果不立即使用,-20℃保存少于一周,,長時(shí)間保存建議-70℃放置,。注意:有實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,,本反轉(zhuǎn)錄酶可在15min內(nèi)完成1kb反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
注意事項(xiàng):1. 用DEPC處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,,或者購買已經(jīng)證明無核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,,實(shí)驗(yàn)過程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免RNA酶的污染,。2. 確保所用試劑及超純水中無RNA酶污染,。3. 純化過的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子,,乙醇和苯酚,,以上成分會(huì)干擾第 鏈cDNA的合成反應(yīng)??刹捎靡掖汲恋鞷NA的方法去除掉痕量污染物,。4. 為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的RNA模板,。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,,不得存放于普通住宅內(nèi),。6. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴 次性手套操作,。
銷售產(chǎn)品:Glabridin | CID 16020046 | Pralsetinib | MARK-IN-2 | Spermine | Zoledronic Acid | Hydroxychloroquine (sulfate) | Aliskiren | BD-1047 (dihydrobromide) | Hydroxyurea
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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