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熒光素標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

MCE 國際站：Fluorescein Phalloidin

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件： -20℃ 6 個(gè)月避光保存,，避免反復(fù)凍融

簡介：熒光素標(biāo)記鬼筆環(huán)肽是一種高親和的 F-肌動(dòng)蛋白探針，與綠色染料熒光素 (Fluorescein) 偶聯(lián),。

概述：鬼筆環(huán)肽 (Phalloidin) 是從鬼筆鵝膏中分離到的一種環(huán)狀七肽毒素,，以較好的親和力和特異性結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲 F-actins (actin filaments)。通常將鬼筆環(huán)肽與熒光染料偶聯(lián)來研究細(xì)胞中 F-actins 的分布,。熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽極少會(huì)非特異性染色,，染色和未染色區(qū)域之間的對比度非常大，可使 F-actins 高效染色,。MCE 提供 3 種熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽 (1000× Stock Solution in DMSO),，AMCA Phalloidin (HY-K0901，藍(lán)色熒光),、Fluorescein Phalloidin (HY-K0902,，綠色熒光)和 Rhodamine Phalloidin (HY-K0903，橙色熒光),。這些鬼筆環(huán)肽衍生物可發(fā)出穩(wěn)定,、高亮度的熒光，染色反應(yīng)特異性強(qiáng),，對比性高,，適用于 F-actins 的定性和定量檢測實(shí)驗(yàn)

描述：

鬼筆環(huán)肽是一種蘑菇衍生的毒素，可用于特異性標(biāo)記細(xì)胞骨架的 F- 肌動(dòng)蛋白（肌動(dòng)蛋白絲）,。它與許多不同動(dòng)物和植物物種的所有肌動(dòng)蛋白絲變體結(jié)合,。通常，鬼筆環(huán)肽與熒光染料結(jié)合使用,。鬼筆環(huán)肽以高選擇性結(jié)合 F- 肌動(dòng)蛋白,，而熒光素提供穩(wěn)定而明亮的綠色熒光。

熒光素鬼筆環(huán)肽是 DMSO 中的 1000× 儲(chǔ)備溶液,，可方便地標(biāo)記,、鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的 F- 肌動(dòng)蛋白,。

操作說明：1. 準(zhǔn)備 1× 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液吸取 1 μL 1000× 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽儲(chǔ)存液到 1 mL 含有 1% BSA 的 PBS 緩沖液中即可得到 1× 工作液,。注 1：不同細(xì)胞染色情況不同，相應(yīng)熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽的使用量需根據(jù)不同情況調(diào)整,。注 2：1% BSA 的使用是為了降低非特異性的背景染色,。2. 細(xì)胞染色步驟1) 用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次。2) 用含有 3.7％ 甲醛的 PBS 溶液固定細(xì)胞,，冰上固定 15 分鐘,。注：甲醇可以在固定過程中破壞肌動(dòng)蛋白。因此最好避免含有任何甲醇的固定劑。優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛,。3) 用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次,。4) 可選步驟：室溫下，用含 0.1％ Triton X-100 的 PBS 溶液透化細(xì)胞 3-5 分鐘,，增加其通透性,。用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次。5) 按 100 μL/孔 (96 孔板)的加入量加入 1× 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液,，室溫避光染色 20-90 分鐘,。6) 用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次，去除多余的熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽,。7) 按每種熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽的最佳推薦激發(fā)/發(fā)射波長,，于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察 (AMCA Phalloidin, Ex/Em=344/432 nm；Fluorescein Phalloidin, Ex/Em= 497/516nm,； Rhodamine Phalloidin, Ex/Em= 552/578 nm)

注意事項(xiàng)：1. 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽的一個(gè)單位 (T) 的定義：按照推薦濃度,，每次用量為 100 μL 染色工作液時(shí)，可以檢測的次數(shù),。2. 鬼筆環(huán)肽具有一定毒性 (LD50 of phalloidin = 2 mg/kg),，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。3. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品

銷售產(chǎn)品：HRP-conjugated AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG H&L  | Motavizumab  | Mirabegron  | L-Ascorbic acid (sodium salt)  | Larotrectinib  | DiZPK  | Ciliobrevin D  | Citric acid  | Dioscin  | Neutral protease from paenibacillus polymyxa

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