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SYBR Green qPCR 預(yù)混液

MCE 國際站：SYBR Green qPCR Master Mix (No ROX)

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件： -20℃ 2 年避光保存,，避免反復(fù)凍融。

簡介：SYBR Green qPCR Master Mix (No ROX) 是一種 2× 濃度的即用型預(yù)混液,，含有 qPCR 的所有組分,， 只需加入樣品 DNA，引物和水即可快速高效完成 qPCR 反應(yīng),。

概述：本產(chǎn)品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進(jìn)行 Real Time PCR 的一種 2× 濃度的 Premix Type 試劑,。制品中含有 Real Time PCR 反應(yīng)的合適濃度 SYBR Green I，Hot Start 法用 DNA 聚合酶,，適合 Real Time PCR 的 Buffer 組合,，可以有效抑制非特異性的 PCR 擴(kuò)增，大大提高 PCR 的擴(kuò)增效率，適合進(jìn)行高靈敏度的RealTime PCR 擴(kuò)增反應(yīng),。本產(chǎn)品適用于快速 Real Time PCR 擴(kuò)增反應(yīng),，可以在寬廣的定量區(qū)間內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確的定量檢測,，重復(fù)性好,，可信度高。本產(chǎn)品預(yù)先混有 Taq DNA Polymerase,、PCR Buffer,、dNTPs、SYBR Green I 熒光染料,、穩(wěn)定劑和鎂離子等通用組分,，只需加入模板、引物,、雙蒸餾水便可進(jìn)行 Real Time PCR 反應(yīng),，操作簡單方便。本品不含有 ROX Reference Dye,，適用于無需校正孔間熒光信號誤差的儀器,。適用機(jī)型：Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler IQ, MyiQ, iQ5, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2 and 4;Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex2 s;Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Corbett Rotor-Gene 3000, Corbett Rotor-Gene 6000;Roche: LightCycler 480, LightCycler 2.0; LightCycler 96;Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.

描述：

Super Hot-Start SYBR Green qPCR Master Mix 是一種即用型 qPCR 混合物。它包含新型 Taq DNA 聚合酶,、熱啟動試劑,、優(yōu)化的緩沖液、SYBR Green I,、dNTP,、PCR 增強(qiáng)劑和 PCR 穩(wěn)定劑。qPCR Master Mix 以 2 倍濃度提供,，可通過添加模板,、引物和 ddH₂O 以 1 倍濃度使用。

MCE qPCR Master Mix（無 ROX）可直接用于穩(wěn)健且低模板的定量 PCR,，具有高靈敏度,、特異性和可靠性。不含 ROX 參比染料,，不適用于不需要參比染料來糾正不同孔之間熒光信號誤差的儀器,。

MCE qPCR Master Mix（不含 ROX）適用于以下實(shí)時 PCR 儀器：

Bio-Rad：CFX96、CFX384,、iCycler IQ,、MyiQ、iQ5,、MiniOpticon,、Opticon,、Opticon 2 和 4；

Eppendorf：Mastercycler ep realplex,、realplex2 s,；

Qiagen：Corbett Rotor-Gene Q、Corbett Rotor-Gene 3000,、Corbett Rotor-Gene 6000,；

Roche：LightCycler 480、LightCycler 2.0,； LightCycler 96;

Thermo Scientific：PikoReal Cycler,；Cepheid：SmartCycler；Illumina：Eco qPCR,。

1. 即用型,。

2. 優(yōu)化的緩沖液可增強(qiáng)特異性并減少引物二聚體的形成。

3. 高靈敏度,、特異性和可靠性,。

4. 不含 ROX 參考染料。

操作說明：1) 配置反應(yīng)體系：建議的模板量為10-100 ng (基因組 DNA)或 1-10 ng (cDNA 模板),。推薦使用 MCE RT Master Mix for qPCR (gDNA digester plus) (HY-K0511)合成 DNA 模版,，以有效去除 RNA 樣品中殘留的基因組。配制 PCR 反應(yīng)液 (反應(yīng)液配制請在冰上進(jìn)行),。注：(1) 通常引物終濃度為 0.2 μM 可以得到較好結(jié)果。反應(yīng)性能較差時,，可以在 0.1～1.0 μM 范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度,。(2) 在 20 μL 反應(yīng)體系中，DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下,。因不同種類的 DNA 模板中含有的靶基因的拷貝數(shù)不同,，必要時可進(jìn)行梯度稀釋，確定合適的 DNA 模板添加量,。(3) 按照各儀器推薦體系進(jìn)行反應(yīng)液配制,。2) 進(jìn)行 Real Time PCR 反應(yīng)。建議采用下列圖表顯示的兩步法 PCR 反應(yīng)程序,，如果該程序得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時,，再進(jìn)行PCR條件的優(yōu)化。由于使用 Tm 值較低的引物等原因,，兩步法PCR 反應(yīng)擴(kuò)增性能較差時,，可以嘗試進(jìn)行三步法 PCR 擴(kuò)增反應(yīng)。注：(1) 預(yù)變性時間：根據(jù)不同模版和引物的具體情況可適當(dāng)縮短至 2 min,；(2) 退火溫度和時間：根據(jù)引物和目的基因的長度進(jìn)行調(diào)整,；(3) 熔解曲線：通常情況下可以使用儀器默認(rèn)程序。

注意事項(xiàng)：1. 使用前，請上下輕輕顛倒混勻,，避免產(chǎn)生氣泡,，防止因混合不均勻造成反應(yīng)效果不佳。(1) 請勿渦旋振蕩混勻,。(2) SYBR Green Master Mix (2×) (No ROX) 在 -80℃ 存放可能會產(chǎn)生白色或淡黃的沉淀,，用手握緩慢溶解，于室溫短時間避光放置,，輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失,。(3) 沉淀會導(dǎo)致溶液成分不均勻，使用前務(wù)必充分混勻試劑,。2. 配制反應(yīng)液時,，試劑請于冰上放置。3. 本制品中含有熒光染料 SYBR Green I,，配制 PCR 反應(yīng)液時避免強(qiáng)光照射,。4. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新(無污染)槍頭,、Microtube 等,，避免污染。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品。6. 為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

銷售產(chǎn)品：Clarithromycin  | PAR-4 Agonist Peptide, amide (TFA)  | 2OH-BNPP1  | Pimozide  | Sintilimab  | ATP-polyamine-biotin  | TAPI-2  | Fmoc-Gly-Gly-Phe-OH  | Prim-O-glucosylcimifugin  | Glycine

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