反轉錄試劑盒 II
MCE 國際站:RT Master Mix for qPCR II
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件: -20℃ 2 年避光保存,避免反復凍融,。
簡介:RT Master Mix for qPCR II 采用升級款反轉錄酶,,反應更高效、快速,,適用于高 GC 含量,、復雜二級結構,、少量 RNA 模板等。即用型預混液,,一步操作即可完成反轉錄反應,,簡便、快捷,。
概述:MCE RT Master Mix for qPCR II 是一款高效,、快速的反轉錄試劑。本品為即用型預混液,,含有反轉錄反應所需的所有組分 (高性能 Reverse Transcriptase, RNase Inhibitor, Oligo dT Primer, Random Primer, RT Buffer, dNTPs Mix),,只需加入 RNA 和 RNase-free H2O 即可快速高效完成反轉錄反應,減少操作過程中的污染幾率,。本品使用升級款逆轉錄酶,,可耐受高達 60℃的反應溫度,適合具有復雜二級結構的 RNA 模板的反轉錄,;與模板的親和力增強,,適用于少量模板以及低拷貝基因的反轉錄反應。反轉錄產物 cDNA 可直接用于 PCR 或 real time quantitative PCR (qPCR),,與 MCE SYBR Green qPCR Master Mix (HY-K0501)配合使用即可進行高性能的基因表達分析,。
描述:
MCE RT Master Mix for qPCR II 是一種方便、即用型逆轉錄配方,。4× Super RT Mix 包含第一鏈 cDNA 合成所需的所有試劑,。添加 RNA 后,優(yōu)化的系統(tǒng)將提供靈敏可靠的 cDNA 合成,。此外,,高級逆轉錄酶的耐熱性增強,使逆轉錄可以在更高的溫度下進行,,從而提高 cDNA 合成的效率和特異性,。
第一鏈 cDNA 合成完成后,cDNA 產物可直接用作標準 PCR 和 qPCR 中的模板,。MCE SYBR Green qPCR Master Mix (HY-K0501) 是檢測感興趣基因表達水平的選項,。
特點:
1. 快速、特異性地合成 cDNA,。
2. 僅需一步轉移,,可顯著減少操作錯誤。
3.優(yōu)化的緩沖液可提高 cDNA 合成的靈敏度和可靠性,。
4. 即使模板量很少,,也能實現(xiàn)超高效的反應(總 RNA:20 μL 反應中 50 pg -5 μg)。
5. 該試劑盒同時提供 Oligo dT Primer 和 Random Primer,。
操作說明:1. 反轉錄反應體系配制(20 μL體系)在 RNase-free PCR 管中,,配制 RT 反應液,,反應液配置操作請在冰上進行。2. 反轉錄程序設置將上述配制的 Mix 混合均勻后,,置于 PCR 儀中進行反應注:反轉錄溫度:推薦使用 55oC,。對于高 GC 含量模板或者結構復雜模板,可將反轉錄溫度提高到 60oC3. 反應結束后,,置于冰上冷卻。合成的 cDNA 可立即用于后續(xù) PCR 或 qPCR 反應,,也可 -20oC 短期保存,,若需長期保存,建議分裝后,,于 -80oC 保存,,避免反復凍融
注意事項:1. 4× Super RT Mix 含有高濃度的甘油,使用前請短暫離心收集到管底部,,并用移液槍輕輕吸打充分混勻后,,準確吸取。2. 建議 RNA 模板溶解于水中,。3. 反應液的配制,,請在冰上操作完成。4. RNA 相關操作等請使用全新 RNase-free 槍頭,、RNase-free 離心管等實驗耗材,。建議 RNA 實驗使用的器具、試劑和無菌水等專用,,避免 RNase 污染,。5. 高質量、完整的 RNA 對于獲得高質量的 cDNA 至關重要,,為保證反轉錄成功,,請使用高質量的 RNA 模板。提取的 Total RNA 中?;煊?gDNA,,而 gDNA 可以直接作為 PCR 模板進行擴增,造成解析結果不準確,。請在引物設計時避免 gDNA 擴增,,或在提取 Total RNA 后使用 DNase I 處理以除去 gDNA,也可選購 MCE RT Master Mix for qPCR II (gDNA digester plus) (HY-K0511A)試劑盒,,以消除 gDNA 對 PCR 擴增的影響,。6. 本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,,不得用于食品或藥品,。7. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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