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小鼠 CD8+ 細(xì)胞陽(yáng)性分選試劑盒

MCE 國(guó)際站：Mouse CD8⁺ Cell Positive Selection Kit

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件：4℃，2 年磁珠禁止凍結(jié)

簡(jiǎn)介：MCE 小鼠 CD8+ 細(xì)胞陽(yáng)性分選試劑盒可以從小鼠脾臟細(xì)胞,、淋巴結(jié)或其它組織的單細(xì)胞懸液中分離出 CD8+ 細(xì)胞,。

概述：MCE 小鼠 CD8+ 細(xì)胞陽(yáng)性分選試劑盒可以從小鼠脾臟細(xì)胞、淋巴結(jié)或其它組織的單細(xì)胞懸液中分離出 CD8+ T 細(xì)胞,。原理為 CD8 Capture Antibody 可以對(duì)CD8+ 細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,，再通過 Releasable Magnetic Beads 對(duì)目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行捕獲，最后用 Magnetic Beads Release Buffer 將磁珠從細(xì)胞表面解離,，從而得到無磁珠標(biāo)記的小鼠 CD8+ 細(xì)胞,。MCE 小鼠 CD8+ 細(xì)胞陽(yáng)性分選試劑盒操作簡(jiǎn)單便攜，各成分對(duì)細(xì)胞均無毒性,，且可實(shí)現(xiàn)高純度細(xì)胞分離的目的,，分離的細(xì)胞可用于下游應(yīng)用，例如流式細(xì)胞術(shù),、細(xì)胞培養(yǎng),、Western blot 分析、免疫沉淀,、報(bào)告基因檢測(cè)或 DNA/RNA 提取等,。MCE 小鼠 CD8+ 細(xì)胞陽(yáng)性分選試劑盒具有如下優(yōu)點(diǎn)：無需分離柱：使用磁性分離器即可實(shí)現(xiàn)目的細(xì)胞的快速分離；高純度：分選細(xì)胞純度可達(dá) 95% 以上,；適用性廣：可直接用于目的細(xì)胞的捕獲,，最終獲得細(xì)胞無磁珠標(biāo)記

描述：

MCE 小鼠 CD8⁺ T 細(xì)胞正選試劑盒用于從小鼠脾細(xì)胞,、淋巴結(jié)或其他組織的單細(xì)胞懸浮液中分離 CD8⁺ 細(xì)胞。其原理是 CD8 捕獲抗體可以標(biāo)記 CD8⁺ 細(xì)胞,，這些靶細(xì)胞被可釋放磁珠捕獲,，最后磁珠釋放緩沖液將磁珠從細(xì)胞表面解離。此過程有效地促進(jìn)了未用磁珠標(biāo)記的小鼠 CD8⁺ 細(xì)胞的分選,。

MCE 小鼠 CD8⁺ T 細(xì)胞正選試劑盒易于使用且便于攜帶,，所含成分對(duì)細(xì)胞無毒。它能夠分離出高純度的細(xì)胞,，所得細(xì)胞可用于各種下游應(yīng)用,。這些包括流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng),、蛋白質(zhì)印跡分析,、免疫沉淀（IP）、報(bào)告基因檢測(cè)和DNA / RNA提取,。

MCE小鼠CD8 ⁺細(xì)胞正選試劑盒的特點(diǎn)

無需分離柱：使用磁分離器即可快速分離細(xì)胞,，無需分離柱；

高純度：可獲得純度超過95％的分選細(xì)胞,；

廣泛適用性：可直接用于目標(biāo)細(xì)胞的捕獲,，并且獲得的最終細(xì)胞不含磁珠標(biāo)記。

操作說明：以分選小鼠脾臟CD8+ 細(xì)胞為例： 1. 制備小鼠脾臟單細(xì)胞懸液：在 70 μm 細(xì)胞篩網(wǎng)上研磨脾臟,，以預(yù)冷的 PBS 沖洗細(xì)胞篩網(wǎng),，收集細(xì)胞懸液于 50 mL 離心管中，500 × g 離心 5 min,，棄上清,。2. 加入 5 mL 紅細(xì)胞裂解液 (ACK)，室溫裂解 5 min,，再加入 20 mL PBS重懸細(xì)胞,，500 × g 離心 5 min，棄上清,。注：a. 紅細(xì)胞裂解步驟可根據(jù)所用裂解液的不同調(diào)整用量及時(shí)間,。b. 少量紅細(xì)胞殘留不會(huì)影響后續(xù)分選及細(xì)胞純度。3. 用 PBS 重懸細(xì)胞,，細(xì)胞懸液用 70 μm 細(xì)胞篩網(wǎng)過濾后,，計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)完成后,，500 × g 離心 5 min,，棄上清。注：細(xì)胞懸液需要過細(xì)胞篩網(wǎng),，以除去組織和細(xì)胞團(tuán)塊,，否則會(huì)影響后續(xù)細(xì)胞分選純度,。4. 用分選緩沖液重懸細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為 1 × 108 cells/mL,。5. 取 500 μL 細(xì)胞懸液 (5 × 107 個(gè)細(xì)胞）加入無菌流式管底部，再加入 10 μL CD8 Capture Antibody,，混勻后 4°C 孵育 10 min,。注：a. 細(xì)胞懸液直接加入流式管底部，避免沿流式管管壁加入,。b. 根據(jù)所使用磁性分離器不同也可使用離心管進(jìn)行細(xì)胞分選,。c. 分選其他數(shù)量的細(xì)胞時(shí)可按比例調(diào)整 CD8 Capture Antibody的用量。如果分選少于 1 × 107 個(gè)細(xì)胞,，則將細(xì)胞懸液體積補(bǔ)至 100 μL,，加入 2 μL CD8 Capture Antibody。6. 磁珠準(zhǔn)備：充分重懸 Releasable Magnetic Beads,，取 100 μL 至 1.5 mL EP管中,，加入 1 mL 分選緩沖液，10000 × g 離心 1 min,，棄上清,。重復(fù)洗滌磁珠 1 - 2 次，加 100 μL 分選緩沖液重懸磁珠,。注：最后磁珠重懸分選緩沖液的用量與初始吸取磁珠體積需一致,。7. 細(xì)胞-抗體孵育完成后，在流式管中加入 100 μL 清洗過的磁珠,，混勻后 4°C 孵育 10 min,。注：分選其他數(shù)量的細(xì)胞時(shí)可按比例調(diào)整 Releasable Magnetic Beads 的用量。如果分選少于 1 × 107 個(gè)細(xì)胞,，則 Releasable Magnetic Beads 的用量為20 μL,。8. 孵育完成后，在流式管中加入 2 mL 分選緩沖液,，用移液器輕柔吹吸混勻（避免劇烈振蕩或者上下顛倒混勻）,。9. 將含有細(xì)胞的分選流式管置于磁性分離器上，磁性分離 5 min,，棄上清,。重復(fù)洗滌磁珠-細(xì)胞混合物 1 - 2 次。10. 將流式管從磁力架上取下,，迅速加入 1 mL Magnetic Beads Release Buffer 重懸磁珠,，避免磁珠干燥，將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至 1.5 mL EP 管中,，室溫旋轉(zhuǎn)孵育 10 min,。注：分選其它數(shù)量細(xì)胞時(shí)可則按比例調(diào)整磁珠的用量,。如果分選少于 1 × 107 個(gè)細(xì)胞，使用 200 μL Magnetic Beads Release Buffer 洗脫細(xì)胞,。11. 孵育完成后,，用移液器輕柔吹吸混勻（避免劇烈振蕩或者上下顛倒混勻），將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至新的流式管中,，置于磁性分離器上,，磁性分離 5 min。12. 將上清液轉(zhuǎn)移至新的流式管中備用（上清液中含有目的細(xì)胞）,，迅速加入1 mL Magnetic Beads Release Buffer重懸磁珠,，避免磁珠干燥，將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至 1.5 mL EP 管中,，室溫旋轉(zhuǎn)孵育 10 min,。13. 孵育完成后，用移液器輕柔吹吸混勻（避免劇烈振蕩或者上下顛倒混勻）,，將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至新的流式管中,，置于磁性分離器上，磁性分離 5 min,。14. 將上清液與第一次洗脫后的上清液混合,，置于磁性分離器上，磁性分離 5 min,，去除殘留磁珠,。15. 將上清液轉(zhuǎn)移至 EP 管中，500 × g 離心 5 min,，棄上清,，即可收集到無磁珠標(biāo)記的CD8+細(xì)胞。16. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要洗滌細(xì)胞,，將細(xì)胞重懸于所需緩沖液或培養(yǎng)基中,，即可用于后續(xù)分子生物學(xué)或細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：1. 抗體混合液使用和保存過程中均應(yīng)避免反復(fù)凍融,、高速離心等操作,。2. 建議選用低吸附移液器吸頭和離心管等耗材，避免因吸附造成磁珠和抗體的損耗,。3. 磁珠在使用和保存過程中應(yīng)避免高速離心,、干燥或凍存；磁珠禁止長(zhǎng)時(shí)間置于磁場(chǎng),，否則會(huì)引起磁珠聚團(tuán)結(jié)塊,，降低其結(jié)合活性。4. 從磁珠保存管中吸取磁珠前應(yīng)充分振蕩混勻，操作過程中動(dòng)作應(yīng)輕柔,，并避免產(chǎn)生氣泡,。5. 本品需要與磁性分離器配套使用。6. 實(shí)驗(yàn)操作過程需輕柔,，避免對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械損傷,。7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品,。8. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

銷售產(chǎn)品：Captopril  | NSC319726  | Zileuton  | Glucoraphanin  | Itaconic acid  | Nifedipine  | PHTPP  | Bexarotene  | Ursolic acid  | Bobcat339 (hydrochloride)

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