小鼠 CD4+ 細(xì)胞陽性分選試劑盒t
MCE 國際站:Mouse CD4+ Cell Positive Selection Kit
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件:4℃,,2 年磁珠禁止凍結(jié)
簡介:MCE 小鼠 CD4+ 細(xì)胞陽性分選試劑盒可以從小鼠脾臟細(xì)胞、淋巴結(jié)或其它組織的單細(xì)胞懸液中分離出 CD4+ T 細(xì)胞,。
概述:MCE 小鼠 CD4+ 細(xì)胞陽性分選試劑盒可以從小鼠脾臟細(xì)胞,、淋巴結(jié)或其它組織的單細(xì)胞懸液中分離出 CD4+ T 細(xì)胞。原理為 CD4 Capture Antibody 可以對 CD4+ 細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,,再通過 Releasable Magnetic Beads 對目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行捕獲,,最后用 Magnetic Beads Release Buffer 將磁珠從細(xì)胞表面解離,從而得到無磁珠標(biāo)記的小鼠 CD4+ 細(xì)胞,。MCE 小鼠 CD4+ 細(xì)胞陽性分選試劑盒操作簡單便攜,,各成分對細(xì)胞均無毒性,且可實(shí)現(xiàn)高純度細(xì)胞分離的目的,,分離的細(xì)胞可用于下游應(yīng)用,,例如流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng),、Western blot 分析,、免疫沉淀、報(bào)告基因檢測或 DNA/RNA 提取等,。MCE 小鼠 CD4+ 細(xì)胞陽性分選試劑盒具有如下優(yōu)點(diǎn):無需分離柱:使用磁性分離器即可實(shí)現(xiàn)目的細(xì)胞的快速分離,;高純度:分選細(xì)胞純度可達(dá) 95% 以上;適用性廣:可直接用于目的細(xì)胞的捕獲,,最終獲得細(xì)胞無磁珠標(biāo)記
描述:
MCE 小鼠 CD4+ T 細(xì)胞正選試劑盒用于從小鼠脾細(xì)胞,、淋巴結(jié)或其他組織的單細(xì)胞懸浮液中分離 CD4+ 細(xì)胞。其原理是 CD4 捕獲抗體可以標(biāo)記 CD4+ 細(xì)胞,,這些靶細(xì)胞被可釋放磁珠捕獲,,最后磁珠釋放緩沖液將磁珠從細(xì)胞表面解離。此過程有效地促進(jìn)了未用磁珠標(biāo)記的小鼠 CD4+ 細(xì)胞的分選,。
MCE 小鼠 CD4+ T 細(xì)胞正選試劑盒易于使用且便于攜帶,,所含成分對細(xì)胞無毒。它能夠分離出高純度的細(xì)胞,,所得細(xì)胞可用于各種下游應(yīng)用,。這些包括流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng),、蛋白質(zhì)印跡分析,、免疫沉淀(IP)、報(bào)告基因檢測和DNA / RNA提取,。
MCE小鼠CD4 + T細(xì)胞正選試劑盒的特點(diǎn)
無需分離柱:使用磁分離器即可快速分離細(xì)胞,,無需分離柱,;
高純度:可獲得純度超過95%的分選細(xì)胞;
廣泛適用性:可直接用于目標(biāo)細(xì)胞的捕獲,,并且獲得的最終細(xì)胞不含磁珠標(biāo)記,。
操作說明:以分選小鼠脾臟CD4+ 細(xì)胞為例: 1. 制備小鼠脾臟單細(xì)胞懸液:在 70 μm 細(xì)胞篩網(wǎng)上研磨脾臟,以預(yù)冷的 PBS 沖洗細(xì)胞篩網(wǎng),,收集細(xì)胞懸液于 50 mL 離心管中,,500 × g 離心 5 min,棄上清,。2. 加入 5 mL 紅細(xì)胞裂解液 (ACK),,室溫裂解 5 min,再加入 20 mL PBS重懸細(xì)胞,,500 × g 離心 5 min,,棄上清。注:a. 紅細(xì)胞裂解步驟可根據(jù)所用裂解液的不同調(diào)整用量及時(shí)間,。b. 少量紅細(xì)胞殘留不會影響后續(xù)分選及細(xì)胞純度,。3. 用 PBS 重懸細(xì)胞,細(xì)胞懸液用 70 μm 細(xì)胞篩網(wǎng)過濾后,,計(jì)數(shù),。計(jì)數(shù)完成后,500 × g 離心 5 min,,棄上清,。注:細(xì)胞懸液需要過細(xì)胞篩網(wǎng),以除去組織和細(xì)胞團(tuán)塊,,否則會影響后續(xù)細(xì)胞分選純度,。4. 用分選緩沖液重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度為 1 × 108 cells/mL,。5. 取 500 μL 細(xì)胞懸液 (5 × 107 個(gè)細(xì)胞)加入無菌流式管底部,,再加入 10 μL CD4 Capture Antibody,混勻后 4°C 孵育 10 min,。注:a. 細(xì)胞懸液直接加入流式管底部,,避免沿流式管管壁加入。b. 根據(jù)所使用磁性分離器不同也可使用離心管進(jìn)行細(xì)胞分選,。c. 分選其他數(shù)量的細(xì)胞時(shí)可按比例調(diào)整 CD4 Capture Antibody的用量,。如果分選少于 1 × 107 個(gè)細(xì)胞,則將細(xì)胞懸液體積補(bǔ)至 100 μL,,加入 2 μL CD4 Capture Antibody,。6. 磁珠準(zhǔn)備:充分重懸 Releasable Magnetic Beads,取 100 μL 至 1.5 mL EP管中,,加入 1 mL 分選緩沖液,,10,000 × g 離心 1 min,,棄上清。重復(fù)洗滌磁珠 1 - 2 次,,加 100 μL 分選緩沖液重懸磁珠。注:磁珠重懸分選緩沖液的用量與初始吸取磁珠體積需一致,。7. 細(xì)胞-抗體孵育完成后,,在流式管中加入 100 μL 清洗過的磁珠,混勻后 4°C 孵育 10 min,。注:分選其他數(shù)量的細(xì)胞時(shí)可按比例調(diào)整 Releasable Magnetic Beads 的用量,。如果分選少于 1 × 107 個(gè)細(xì)胞,則 Releasable Magnetic Beads 的用量為20 μL,。8. 孵育完成后,,在流式管中加入 2 mL 分選緩沖液,用移液器輕柔吹吸混勻(避免劇烈振蕩或者上下顛倒混勻),。9. 將含有細(xì)胞的分選流式管置于磁性分離器上,,磁性分離 5 min,棄上清,。重復(fù)洗滌磁珠-細(xì)胞混合物 1 - 2 次,。10. 將流式管從磁力架上取下,迅速加入 1 mL Magnetic Beads Release Buffer 重懸磁珠,,避免磁珠干燥,,將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至 1.5 mL EP 管中,室溫旋轉(zhuǎn)孵育 10 min,。注:分選其它數(shù)量細(xì)胞時(shí)可則按比例調(diào)整磁珠的用量,。如果分選少于 1 × 107 個(gè)細(xì)胞,使用 200 μL Magnetic Beads Release Buffer 洗脫細(xì)胞,。11. 孵育完成后,,用移液器輕柔吹吸混勻(避免劇烈振蕩或者上下顛倒混勻),將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至新的流式管中,,置于磁性分離器上,,磁性分離 5 min。12. 將上清液轉(zhuǎn)移至新的流式管中備用(上清液中含有目的細(xì)胞),,迅速加入1 mL Magnetic Beads Release Buffer重懸磁珠,,避免磁珠干燥,將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至 1.5 mL EP 管中,,室溫旋轉(zhuǎn)孵育 10 min,。13. 孵育完成后,用移液器輕柔吹吸混勻(避免劇烈振蕩或者上下顛倒混勻),,將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至新的流式管中,,置于磁性分離器上,,磁性分離 5 min。14. 將上清液與第一次洗脫后的上清液混合,,置于磁性分離器上,,磁性分 5 min,去除殘留磁珠,。15. 將上清液轉(zhuǎn)移至 EP 管中,,500 × g 離心 5 min,棄上清,,即可收集到無磁珠標(biāo)記的CD4+細(xì)胞,。16. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要洗滌細(xì)胞,將細(xì)胞重懸于所需緩沖液或培養(yǎng)基中,,即可用于后續(xù)分子生物學(xué)或細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):1. 抗體混合液使用和保存過程中均應(yīng)避免反復(fù)凍融,、高速離心等操作。2. 建議選用低吸附移液器吸頭和離心管等耗材,,避免因吸附造成磁珠和抗體的損耗,。3. 磁珠在使用和保存過程中應(yīng)避免高速離心、干燥或凍存,;磁珠禁止長時(shí)間置于磁場,,否則會引起磁珠聚團(tuán)結(jié)塊,降低其結(jié)合活性,。4. 從磁珠保存管中吸取磁珠前應(yīng)充分振蕩混勻,,操作過程中動作應(yīng)輕柔,并避免產(chǎn)生氣泡,。5. 本品需要與磁性分離器配套使用,。6. 實(shí)驗(yàn)操作過程需輕柔,避免對細(xì)胞造成機(jī)械損傷,。7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,。8. 為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
銷售產(chǎn)品:Amlexanox | Devazepide | Tipranavir | Disitamab | EPZ015666 | 6-OAU | Vitamin B12 | BpV(HOpic) | Ly93 | Damnacanthal
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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