ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒
MCE 國際站：Cell-ATP Viability Detection Kit
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件： -20°C,，一年避光保存
簡介：MCE ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù),，通過對 ATP 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。
概述：MCE ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù),，通過對 ATP 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。ATP 是細(xì)胞新陳代謝的一個重要指標(biāo),，其與活細(xì)胞數(shù)目呈良好的線性關(guān)系,，是細(xì)胞活力檢測的重要標(biāo)志性分子。ATP 生物發(fā)光技術(shù)的原理為：熒光素酶以熒光素,、三磷酸腺苷 (ATP) 和 O2 為底物,，在 Mg2+ 存在時，可將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能,；在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中,，ATP 在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強(qiáng)度呈線性關(guān)系,，即在光信號與酶反應(yīng)體系中,，發(fā)光值與 ATP 呈正比，ATP 與活細(xì)胞數(shù)成正比,?；诖耍珹TP 法便可通過 ATP 含量來進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)或活力測定，且不受化合物自發(fā)熒光的影響,。使用時,，只需將本試劑等體積添加至培養(yǎng)細(xì)胞中即可進(jìn)行檢測，均質(zhì)檢測方案避免了同類檢測產(chǎn)品使用時的細(xì)胞洗滌,、培養(yǎng)基去除及多步加樣等操作,，簡便快捷，減少操作誤差,。與常用的 MTT,、CCK8 法相比，ATP 法具有反應(yīng)更迅速,、靈敏度更高,、線性范圍更廣、信號更穩(wěn)定及便捷高效等優(yōu)點,。本品與常用的細(xì)胞培養(yǎng)基兼容，如 RPMI1640,、MEM,、DMEM 和 Ham's F12，也不受酚紅和有機(jī)溶劑的影響,，誤差小，準(zhǔn)確率高,，且適用于自動化高通量篩選,，為細(xì)胞增殖與毒性分析提供了更加高效、便捷的解決方案,。
描述：
ATP是細(xì)胞代謝的重要指標(biāo),，與活細(xì)胞數(shù)量呈良好的線性關(guān)系。ATP生物發(fā)光技術(shù)原理為：熒光素酶以熒光素,、三磷酸腺苷（ATP）和O2為底物,，在Mg2+存在下將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。在Luciflucase催化的發(fā)光反應(yīng)中,，在一定濃度范圍內(nèi)，ATP濃度與發(fā)光強(qiáng)度呈線性關(guān)系,，ATP的量與細(xì)胞數(shù)量成正比,?；诖?，Cell-ATP活力檢測試劑盒可用于細(xì)胞計數(shù)或通過ATP含量測定活力。
MCE Cell-ATP活力檢測試劑盒是基于高靈敏度的ATP生物發(fā)光檢測技術(shù)，用于檢測培養(yǎng)中的活細(xì)胞數(shù)量和活力,。
操作說明：熒光素酶的活性對溫度較為敏感，故在實驗開始前,，應(yīng)先將本試劑與細(xì)胞平衡至室溫后再進(jìn)行測定。多次使用時,，建議將本產(chǎn)品適當(dāng)分裝凍存。根據(jù)實驗需求,，選擇適用于化學(xué)發(fā)光檢測的孔板用于本實驗 (如適合細(xì)胞培養(yǎng)的白色或黑色多孔板),，以下以 96 孔板舉例。1. 細(xì)胞準(zhǔn)備接種細(xì)胞：在 96 孔板中每孔接種 100 μL 細(xì)胞,，確保每孔細(xì)胞數(shù)量在 5 × 104 以內(nèi),。設(shè)置不含細(xì)胞的培養(yǎng)液孔作為陰性對照，按照培養(yǎng)細(xì)胞的常規(guī)方法進(jìn)行培養(yǎng),。注：a) 接種細(xì)胞數(shù)目因檢測所用孔板不同存在差異,，如用 384 孔板，每孔接種 25 μL 細(xì)胞,，確保每孔細(xì)胞數(shù)量在 1 × 104 以內(nèi),。b) 可根據(jù)實驗?zāi)康脑O(shè)計實驗方案，如：加入藥物處理細(xì)胞,，應(yīng)注意設(shè)置對照,。若待測藥物的溶劑含量較高，熒光素酶反應(yīng)可能會被干擾,，致化學(xué)發(fā)光信號受到影響,，可設(shè)置含有溶劑的細(xì)胞培養(yǎng)液的對照孔以排除此干擾,。c) 建議設(shè)置細(xì)胞濃度梯度,，以確定 ATP 檢測的條件。2. 檢測試劑的準(zhǔn)備按照 96 孔板每孔 100 μL 的Cell-ATP Viability Detection Reagent 的量 (384 孔板每孔 25 μL 的 Cell-ATP Viability Detection Reagent 的量),，即V細(xì)胞：VCell-ATP Reagent= 1:1),，取適量本產(chǎn)品，解凍后平衡至室溫,。3. 細(xì)胞活力檢測1) 取出細(xì)胞培養(yǎng)板,，室溫平衡 10 min,。注：室溫平衡通常不建議超過 30 min,。2) 向 96 孔板的每孔加入 100 μL Cell-ATP Viability Detection Reagent (384 孔板每孔加入 25 μL Cell-ATP Viability Detection Reagent) ,。3) 室溫振蕩混勻 2 min,，以促進(jìn)細(xì)胞充分裂解。4) 室溫孵育 10 min,，使發(fā)光信號趨于穩(wěn)定,。5) 使用具有檢測化學(xué)發(fā)光功能的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行化學(xué)發(fā)光測定，每個孔的檢測時間一般為 0.25-1 s,。注：具體參數(shù)可根據(jù)儀器類型及檢測靈敏度進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,。6) 根據(jù)化學(xué)發(fā)光讀數(shù)直接計算細(xì)胞的相對活力，或根據(jù) ATP 標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出 ATP 的量以計算出細(xì)胞的相對活力,。注：檢測效果可能會因細(xì)胞種類及生長狀態(tài)不同而有所差異,，對于一些 ATP 含量特別高的細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞數(shù)量至 5 × 104 后可能不會再呈現(xiàn)明顯的線性關(guān)系,，但化學(xué)發(fā)光讀數(shù)還是會繼續(xù)升高,。
注意事項：1. 本產(chǎn)品中含有熒光素酶，其活性對溫度較為敏感,，反復(fù)凍融會致其逐漸失活,，建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融,。2. 本產(chǎn)品避免室溫保存,，如需多次使用，建議將試劑分裝后凍存,，分裝所用耗材應(yīng)避免 ATP 污染。3. 反復(fù)凍融時,，可能會導(dǎo)致試劑中出現(xiàn)少量沉淀,，可平衡至室溫后觀測沉淀溶解情況，如仍有殘留,，可離心后去除,。4. 若待測藥物的溶劑含量較高，熒光素酶反應(yīng)可能會被干擾,，致化學(xué)發(fā)光信號受到影響,，可設(shè)置含有溶劑的細(xì)胞培養(yǎng)液的對照孔以排除此干擾。5. 檢測時需使用適合于細(xì)胞培養(yǎng)的白色或黑色的多孔板 (96 孔板或 384 孔板),，普通透明多孔板的相鄰孔之間可能會產(chǎn)生相互干擾,。6. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品,。7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
銷售產(chǎn)品：FL118 | Teduglutide | Brigatinib | Salvianolic acid B | Harringtonine | Ganglioside GM3 | Rifampicin | Sulfo-NHS-SS-Biotin (sodium) | Tetrahydrobiopterin | CART(55-102)(human)
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