蛋白 L 磁珠
MCE 國(guó)際站：Protein L Magnetic Beads
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件：4°C 2 年
簡(jiǎn)介：Protein L Magnetic Beads 使用納米表面生物技術(shù)將 Protein L 包被在超順磁性磁珠微球表面,。磁珠表面抗體結(jié)合位點(diǎn)多,，非特異性結(jié)合低，使用簡(jiǎn)便有效,。
概述：MCE Protein L Magnetic Beads 使用納米表面生物技術(shù)將 Protein L 包被在超順磁性磁珠微球表面,，磁珠直徑為 0.2 μm。磁珠表面抗體結(jié)合位點(diǎn)多,，非特異性結(jié)合低,，使用簡(jiǎn)便有效,。MCE Protein L 免疫沉淀磁珠具有大面積特異的表面區(qū)域，從而大大縮短了抗體吸附和抗原結(jié)合的時(shí)間,。MCE Protein L 免疫沉淀磁珠適用的樣品范圍廣泛,，細(xì)胞裂解液、細(xì)胞分泌液上清,、血清,、動(dòng)物腹水以及其它的免疫抗原等均適用本產(chǎn)品。
描述：
Protein L 磁珠含有重組 Protein L,，可與具有適當(dāng) Kappa 輕鏈的抗體種屬和亞型結(jié)合，而 Lambda 輕鏈和部分 Kappa 輕鏈不結(jié)合,。IP 過程中所需磁珠較少,，非特異性結(jié)合低，使 Protein L 磁珠可方便高效地用于 IP,。
操作說明：1. 抗原樣品的準(zhǔn)備2. 磁珠預(yù)處理將磁珠充分混懸,，取 25-50 μL 磁珠，置于 1.5 mL EP 管中,，加入 400 μL 結(jié)合/洗滌緩沖液,，充分混懸，置于磁力架,，磁性分離,，棄上清；重復(fù)以上洗滌步驟 2 次,。3. 抗體與磁珠結(jié)合(1) 抗體預(yù)處理：使用結(jié)合/洗滌緩沖液將抗體稀釋至終濃度為 5-50 μg/mL,。(2) 抗體-磁珠結(jié)合：將稀釋好的 400 μL 抗體加入步驟 2 處理好的磁珠中，充分混懸,，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (常溫,，30 mins；4oC,，2 hours),，磁性分離，收集磁珠,，上清液收集于新的 EP 管中,，以備后續(xù)使用。(3) 洗滌：加入 400 μL 結(jié)合/洗滌緩沖液,，充分混懸磁珠,，磁性分離，棄上清,；重復(fù)洗滌 4 次,。注：結(jié)合過程中,，磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀，屬于在正?，F(xiàn)象,，不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果4. 抗原與抗體-磁珠復(fù)合物結(jié)合(1) 抗原-抗體-磁珠復(fù)合物結(jié)合：加入 400 μL 步驟 1 準(zhǔn)備的抗原樣品，充分混懸,，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (常溫,，30 mins；4oC,，2 hours),，磁性分離，棄上清,。(2) 洗滌：使用 400 μL 結(jié)合/洗滌緩沖液充分重懸磁珠,，磁性分離，棄上清,；重復(fù)洗滌 4 次,。5. 抗原洗脫本說明書提供以下兩種抗原洗脫方案，操作者可根據(jù)后期檢測(cè)的需要選擇不同的抗原洗脫方法,。a 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適合用于 SDS-PAGE 檢測(cè),。步驟：分離磁珠，棄上清,，向磁珠中加入 25-50 μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻,，95oC 加熱 5 mins。分離磁珠,，收集上清,，進(jìn)行 SDS-PAGE 檢測(cè)。b 非變性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性,，可用于后期功能分析,。步驟：分離磁珠，棄上清,，向磁珠中加入 25-50 μL 洗脫緩沖液,，室溫孵育 10 mins；分離磁珠,，收集上清至新的 EP 管,，并立即滴入總體積 1/10體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH)，將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性,，樣品用于后期功能分析,。注：本步驟洗脫的抗原為抗原-抗體復(fù)合物，如操作者需要單獨(dú)洗脫目標(biāo)抗原,，推薦使用交聯(lián)劑,，并按相關(guān)實(shí)驗(yàn)說明操作,。
注意事項(xiàng)：1. 本產(chǎn)品 pH 值為 6-8，禁止凍結(jié),。2. 本產(chǎn)品應(yīng)避免離心,、干燥或凍存，禁止長(zhǎng)時(shí)間置于磁場(chǎng),，可能會(huì)引起磁珠聚團(tuán),，抗體結(jié)合后操作過程應(yīng)輕柔，避免抗體脫落,。3. 為最大限度的降低蛋白質(zhì)降解,，請(qǐng)配合使用 MCE 蛋白酶抑制劑 cocktails(MCE 產(chǎn)品目錄號(hào)：HY-K0010，HY-K0011),。4. 使用前請(qǐng)先通過查閱附錄確認(rèn)抗體所屬亞型與 Protein A/G 的親和度,，如親和度不佳，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時(shí)間 (30-120 mins),、提高結(jié)合緩沖液的 pH 值 (8-9) 以及降低離子強(qiáng)度 (25-100 mM NaCl) 等方法提高親和效率。5. 為提高磁珠在免疫沉淀反應(yīng)中的特異性,，可以先將抗體與樣品進(jìn)行孵育,，形成抗體-抗原復(fù)合物，再用 Protein A/G 磁珠捕獲復(fù)合物6. 磁珠在低 pH 的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬于正?，F(xiàn)象,。在結(jié)合/洗滌緩沖液和洗脫緩沖液中添加終濃度為 0.1 % (v/v) 的非離子型去垢劑 (如 NP-40、Tween-20 或 Triton X-100) 可有效防止磁珠聚集,。經(jīng)過低 pH 洗脫操作的磁珠可以用結(jié)合/洗滌緩沖液洗滌至中性,，然后用含有 0.1 % (v/v) Tween-20 的Tris Buffer (pH 7.5) 振蕩重懸磁珠，并用超聲波水浴處理 2 mins,，即可使磁珠恢復(fù)均勻狀態(tài),，以上處理均不影響磁珠的抗體結(jié)合效率7. 超聲處理會(huì)使磁珠在樣品溶液中捕獲的抗體脫落，所以磁珠在捕獲抗體后不宜使用該方法重懸磁珠,。8. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品,。9. 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
銷售產(chǎn)品：Durvalumab | Mertansine | Futibatinib | BT2 | Plerixafor | Nocodazole | SAH | Acalabrutinib | Picrotoxin | Valinomycin
Trending products：Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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