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訪問次數(shù):259更新時間:2023-06-10 10:06:04
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一,、豬偽狂犬病毒gB抗體檢測試劑盒
通用名:豬偽狂犬病毒gB抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Pseudorabies Virus gB (ELISA)
二,、包裝規(guī)格 96T×1/盒,、96T×2/盒、96T*5/盒
三,、預(yù)期用途 偽狂犬病又名奧耶斯基氏?。ˋujeszky's disease),是由偽狂犬病毒(Pseudorabies Virus,,PRV)引起的家畜和多種野生動物的一種以發(fā)熱,、奇癢、呼吸和神經(jīng)系統(tǒng)疾病為特征的急性傳染病,。
本試劑用于檢測豬血清中豬偽狂犬病毒gB抗體,,可用于豬偽狂犬病毒疫苗免疫效果評價。
四,、豬偽狂犬病毒gB抗體檢測試劑盒原理
本試劑盒由預(yù)包被豬偽狂犬病毒重組gB蛋白的酶標板,、酶標記物及其他配套試劑組成,,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬偽狂犬病毒gB抗體,。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬偽狂犬病毒B抗體,則將與酶標板上抗原結(jié)合,,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后,;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合,;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物,,在孔中加TMB底物液,與酶標結(jié)合物反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物,,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān),;加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色,;用酶標儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,,即可知樣品是否含有豬偽狂犬gB抗體。
五,、豬偽狂犬病毒gB抗體試劑盒組成
酶標板,、酶標記物、樣品稀釋液,、濃縮洗滌液,、底物液A、底物液B,、陽性對照、陰性對照
六,、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,,避免受潮,。使用期限為2個月。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,,恢復(fù)至室溫,。
2.取所需用量酶標板條,設(shè)陰性/陽性對照各2孔,,未用的板條盡快密封,,2~8℃保存。
3.陰,、陽性對照孔分別加入陰,、陽性對照100μl,;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,,蓋好蓋板膜,,置37℃避光反應(yīng)30分鐘。
5.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加350μl工作洗滌液,,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,,最后一次拍干,。
6.每孔加酶標記物100μl,蓋好蓋板膜,,置37℃避光反應(yīng)30分鐘,。
7.洗滌,同步驟5,。
8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl,混勻,,蓋好蓋板膜,,置37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,,混勻,,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值。
【參考值】 實驗正常的情況下,,陰性對照的平均OD值即ODNC應(yīng)≤0.3,,陽性對照的平均OD值即ODPC應(yīng)≥0.6。
【檢驗結(jié)果的判定】
1.樣品的OD值即ODS,;
2.閾值計算:SP值=(ODS-ODNC)/(ODPC-ODNC),;
SP值≥0.2,結(jié)果判定為陽性,;SP值<0.2,,結(jié)果判定為陰性。
3.本實驗結(jié)果為陰性時表明豬只抗體水平不足,,建議補打相應(yīng)疫苗,。
【試驗方法的局限性】
該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬偽狂犬病毒gB抗體,,根據(jù)SP值高低可作抗體水平強,、中、弱的粗略評估,。