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氯霉素是一種高效廣譜的抗生素,,對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌均有較好的抑制作用,。人體過(guò)量攝入氯霉素可能引起人肝臟和骨髓造血機(jī)能的損害,,導(dǎo)致再生障礙性貧血和血小板減少,、肝損傷等健康危害,?!妒称分锌赡苓`法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑品種名單(第五批)》(整頓辦函〔2011〕1號(hào))中規(guī)定,,氯霉素在肉制品中不得檢出。肉制品中檢出氯霉素的原因,,可能是生產(chǎn)企業(yè)采購(gòu)了含有氯霉素的原料肉,;也可能是生產(chǎn)過(guò)程中衛(wèi)生控制和出廠(chǎng)檢驗(yàn)不嚴(yán)格。
深圳艾瑞斯生產(chǎn)的氯霉素膠體金快速檢測(cè)卡應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制膠體金免疫層析的原理制成,,用于檢測(cè)組織樣本中氯霉素(Chloramphenicol,,CAP)。樣本溶液滴入檢測(cè)卡的加樣孔后,,樣本溶液中的氯霉素與金標(biāo)抗體相結(jié)合,,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上氯霉素偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的氯霉素含量大于檢測(cè)限時(shí)檢測(cè)線(xiàn)不顯色,,結(jié)果為陽(yáng)性,;當(dāng)樣本溶液中氯霉素含量小于檢測(cè)限時(shí)檢測(cè)線(xiàn)顯紫紅色(T線(xiàn)與C線(xiàn)一致或更深),結(jié)果為陰性,。
樣本前處理:
1,、取切碎的一定量的去脂肪畜產(chǎn)品組織樣品,用均質(zhì)機(jī)均質(zhì),;
2,、稱(chēng)取約2 g 均質(zhì)物于15 mL 離心管中;
3,、依次加入2 mL純凈水和2 mL乙酸乙酯,,劇烈振蕩混勻;
4,、室溫下(20-25℃) 4000 轉(zhuǎn)/分鐘 離心5 分鐘,;
5,、用移液器移取 1 mL 上清液于10 mL離心管中,65℃下氮(空)氣吹干,,得固體殘?jiān)?/p>
6,、先加入1 mL正己烷,振蕩混合均勻,;再加入0.3 mL樣本復(fù)溶液,,混合均勻后靜置,,液體明顯分層,,取下層液體備用。
氯霉素膠體金快速檢測(cè)卡樣品檢測(cè):
1,、從原包裝袋中取出試劑板,,水平放置于觀(guān)察者正面;
2,、吸取下層液體120μL于金標(biāo)微孔中,,吹打混勻(至少吹打10次),直至金標(biāo)微孔內(nèi)紅色物質(zhì)完全溶解,,等待2分鐘,,吸取全部液體滴加到檢測(cè)卡的加樣孔中;
3,、 加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí),,室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果,超過(guò)10分鐘的結(jié)果只能作為參考,。
結(jié)果判斷:
陰性:對(duì)照線(xiàn)(C)出現(xiàn)紫紅色線(xiàn),,檢測(cè)線(xiàn)(T)顯色。
陽(yáng)性:對(duì)照線(xiàn)(C)出現(xiàn)紫紅色線(xiàn),,檢測(cè)線(xiàn)(T)不顯色,。
失效:在檢測(cè)窗內(nèi),對(duì)照線(xiàn)(C)不出現(xiàn)紫紅色線(xiàn),。
注意事項(xiàng):
1,、過(guò)期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用,。
2,、 檢測(cè)卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開(kāi),打開(kāi)的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效,。
3 ,、不要觸摸檢測(cè)卡中央的白色膜面。
4 ,、取液滴管不可混用,,以免交叉污染,。
5 、待檢樣品溶液需清亮,、無(wú)混濁顆粒,、無(wú)細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞,、顯色不明顯等異?,F(xiàn)象,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定,。