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SU-DHL-6人大細胞淋巴瘤細胞（STR鑒定正確）產(chǎn)品基本信息

細胞名稱：SU-DHL-6，人大細胞淋巴瘤細胞

來源：china科學昆明細胞庫

規(guī)格：1x106cells/T25或1mL凍存管

種屬來源：人

組織來源：B細胞

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)基: RPMI-1640+10% FBS+PS+2mM L-glutamine

生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳代方法：1:2至1:4,，每周 2-3次

凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS,，液氮儲存

支原體檢測：無

注意：不能分太稀!血清質(zhì)量要好!

SU-DHL-6人大細胞淋巴瘤細胞培養(yǎng)操作

1)復蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。

2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心3-5min分鐘，棄去上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3)細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例;

a,、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中,，1000 rpm條件下離心4 min,，棄去上清液,，用PBS清洗一遍，棄盡PBS,，然后進行細胞計數(shù),。

b、根據(jù)細胞數(shù)量對應加入無血清細胞凍存液,，使細胞密度5×106~1×107/mL,，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液,，注意凍存管做好標識,。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

培養(yǎng)注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。

2. 仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,，確保細胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔,。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞,。死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象,。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h,。

4. 貼壁細胞可以消化,，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清,。加5 mL PBS重懸細胞,，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，,，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和我司技術(shù)部溝通交流,。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。

7. 該細胞僅供科研使用,。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。收到細胞后一次傳代建議1：2傳代 ,。

9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿,。