小鼠葉綠素酶(chlorophyllase)elisa試劑盒

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ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病,、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單,、快速,、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗ti,，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法,。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,，

免責(zé)聲明

1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗,，否則所產(chǎn)生的一切后果,，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé),。

2. 嚴(yán)格按照說明書操作,，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān),。

3. 產(chǎn)品特點

一,、高效、靈敏,、特異的抗ti,；

二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,；

三,、吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高的固相載體,；

四、適用血清,、血漿,、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型,；

五、節(jié)省實驗經(jīng)費,。

elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM,，就是1毫克/升,，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%,，這個與真實成分有密切的關(guān)系,，說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測定,，樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,，取100mL被測水樣品，加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,，測定時忽略體積變化,，如果測定出樣品中無機(jī)氯為29.8mg/L，則認(rèn)為回收率為99%,。

小鼠葉綠素酶(chlorophyllase)elisa試劑盒

組成結(jié)構(gòu)

1,、血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)du素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2,、血漿：EDTA,、檸檬suan鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。

3、細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4,、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液,。

5、保存：如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

試劑盒成分

1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

2 酶標(biāo)記抗ti: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2

4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biāo)記抗ti稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

7 終止液: 1N硫suan 12mL x 1

8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗ti和顯色劑)

常用方法及原理如下：

1. 夾心法：

夾心法常用于檢測大分子抗原,，一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗ti固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗ti

b. 加入待測檢體,，檢體中若含有待測的抗原,，則其會與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)

c. 洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原專一的一次抗ti,，與待測抗原進(jìn)行鍵結(jié)

d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗ti,，加入帶有酶的二次抗ti，與一次抗ti鍵結(jié)

e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,，加入酶底物使酵素呈色,，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果

原理：針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗ti分別作為固相抗ti和酶標(biāo)抗ti，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,。

2. 間接法

間接法常用于檢測抗ti,，一般的操作步驟為：

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原,。

b. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的一次抗ti,，則其會與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié),。

c. 洗去多余待測檢體，加入帶有酶的二次抗ti,，與待測的一次抗ti鍵結(jié),。

d. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti，加入酶底物使酶呈色,，藉儀器（ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值（OD值）,，以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗ti的含量。

原理：利用酶標(biāo)記的抗抗ti以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗ti,。

3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制,，一般用于檢測小分子抗原，其操作步驟為：

a. 將具有專一性的抗ti固著于塑膠孔盤上,，完成后洗去多余抗ti

b. 加入待測檢體,，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)

c. 加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié),，由于塑膠孔盤上固著的抗ti數(shù)量有限,，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗ti就越少,，亦即,，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗ti鍵結(jié)，即所謂競爭法之由來,。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,，加入酶底物使酶呈色,，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,，顯色也就越淺,。

e. 當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗ti的抗原，或是不易得到足夠的純化抗ti以固著于孔盤上時,，一般會考慮使用競爭法ELISA,。

常見問題解析：

1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,，但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍,。

2、加樣中可能遇到的問題,。

3,、洗板時容易造成誤差。

4,、顯色問題：使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,，都有可能造成顯色劑不顯色。

5,、終止反應(yīng)：在加終止劑的時候由于傾倒速度快,，產(chǎn)生氣泡，造成假陽性結(jié)果,，所以在倒終止劑的時候要緩慢倒,。

6、讀板：讀板的時候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈,。

深圳瑞清生物信息科技有限公司的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用,，長期和各大高校、研究機(jī)構(gòu),、工廠,、企業(yè)等建立了深厚的合作關(guān)系，我們的企業(yè)文化是為樹立行業(yè)的地位而不懈努力,，為科研事業(yè)貢獻(xiàn)綿薄之力,！公司的核心價值是誠信為本，為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品,、為員工提供發(fā)展平臺,、為社會創(chuàng)造更多價值。

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