大鼠轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TP2)elisa試劑盒

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Elisa試劑盒系列：

ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒,、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒,、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,，比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。

ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,，得到科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣,，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展,。

Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng),，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,，操作簡(jiǎn)便,，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中,。

可檢測(cè)種屬

（人,，小鼠，大鼠,，植物,，魚，蝦,，蟹,，牛,，羊，狗,，貓,，微生物，細(xì)胞,，土壤等動(dòng)植物）

可以檢測(cè)樣為

（血清,，血漿，唾液,，尿液,，組織，細(xì)胞上清,，裂解液等）

產(chǎn)品檢測(cè)目的：

樣本水平表達(dá)（定量檢測(cè),，定性檢測(cè)，酶活性檢測(cè)）

規(guī)格：96T 可以檢測(cè)89個(gè)樣  48T可以檢測(cè)41個(gè)樣

備注：6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)一個(gè)空白對(duì)照

有效期：6個(gè)月 保存2-8°C

大鼠轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TP2)elisa試劑盒

elisa試劑盒的優(yōu)點(diǎn)：

一,、高效,、靈敏、特異的抗體,；

二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；

三,、吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高的固相載體,；

四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,；

五,、最大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

常用方法及原理如下：

1. 夾心法：

夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,，一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗體固著（coating）于塑膠孔盤上,，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的抗原,，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)

c. 洗去多余待測(cè)檢體,，加入另一種對(duì)抗原專一的一次抗體，與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)

d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,，加入帶有酶的二次抗體,，與一次抗體鍵結(jié)

e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果

原理：針對(duì)抗原分子上2個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,。

2. 間接法

間接法常用于檢測(cè)抗體，一般的操作步驟為：

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,，完成后洗去多余的抗原,。

b. 加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的一次抗體,，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié),。

c. 洗去多余待測(cè)檢體，加入帶有酶的二次抗體,，與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié),。

d. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酶呈色,，藉儀器（ELISA reader）測(cè)定塑膠盤中的吸光值（OD值）,，以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。

原理：利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體,。

3. 競(jìng)爭(zhēng)法

競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,，一般用于檢測(cè)小分子抗原，其操作步驟為：

a. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測(cè)檢體,，使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)

c. 加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié),，由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限,，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,，亦即，兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié),，即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來,。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色,，當(dāng)檢體中抗原量越多,，代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺,。

e. 當(dāng)需要偵測(cè)無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時(shí)，一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA,。

原理：將特異性抗體包被于固相載體表面,，經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標(biāo)記抗原和被測(cè)抗原的混合液,，另一組只加酶標(biāo)記抗原，經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色,，這兩組底物降解量之差,，即為所要測(cè)定的未知抗原的量。

試劑盒小貼士

1. 在收到試劑盒后,，為保證檢測(cè)效果,，需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲(chǔ)存。除非特別注明,，試劑盒大多是在2～8°C條件下儲(chǔ)存

2. 在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,，請(qǐng)確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說明書一致，再進(jìn)行后續(xù)操作

3. 溶解標(biāo)準(zhǔn)品過程中,，注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮,，過程中要避免產(chǎn)生泡沫

4. 為了避免交叉污染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,、上樣,、加不同試劑都需要換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽

5. 每次孵育時(shí),，正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性

6. 正確洗板有助于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性

7. TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無色,，請(qǐng)避光保存。加入孔板后,，將由無色變成不同程度的藍(lán)色

8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致,，加入終止液，溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,。如果出現(xiàn)綠色,，即表明終止液與底物未混勻，請(qǐng)充分混合

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