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廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地深圳市
更新時間:2023-02-23 19:07:32瀏覽次數(shù):358次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)小鼠神經(jīng)源性分化蛋白1(NDP1)elisa試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T/48T |
---|---|---|---|
貨號 | RQ-FH2929A | 主要用途 | 科研試驗 |
品牌 | 瑞清 | 方法 | 競爭法、夾心法,、間接法 |
檢測樣本 | 血清.血漿.組織.相關(guān)液體等 | 檢測種屬 | 人,,小鼠,,大鼠,,植物,,魚,,蝦,,蟹,牛,,羊,,狗,貓,,微生物,,細胞,土壤等動植物 |
產(chǎn)品優(yōu)勢 | 靈敏性高特異性強 |
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 |
我司產(chǎn)品齊全,,因上架數(shù)量有限,,有其他產(chǎn)品需求請直接聯(lián)系我司銷售!
檢測原理
試劑盒采用雙抗原一-步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) ,。往預(yù)先包被病毒性腹瀉病毒抗ti的包被微孔中,,依次加入標本、HRP標記的檢測抗原,,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在suan的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450NM波長下測定吸光度(OD值) ,,與CUTOFF值相比較,,從而判定標本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的存在與否。
樣品收集,、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3.細胞上清液: 3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn) 離心10分鐘取上清,。
5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20°C,, 避免反
復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標儀(450NM)
2.高精度加樣器及槍頭: 0.5-10UL,、 2-20UL,、 20-200UL、 200-1000UL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項
1.試劑盒保存在2-8°C,,使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,,水浴加熱使結(jié)晶完quan溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,,密封(低溫干燥)保存,。
3.預(yù)處理后的樣本請按照操作步驟用樣ben稀釋ye適當稀釋以達到試劑盒的的最jia檢測效果。.
4.嚴格按照說明書中標明的時間,、加液量及順序進行溫育操作,。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 |
常用方法:
1. 夾心法:
夾心法常用于檢測大分子抗原,,一般的操作步驟為:
a. 將具有專一性的抗ti固著(coating)于塑膠孔盤上,,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,,則其會與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結(jié)
c. 洗去多余待測檢體,,加入另一種對抗原專一的一次抗ti,與待測抗原進行鍵結(jié)
d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗ti,,加入帶有酶的二次抗ti,,與一次抗ti鍵結(jié)
e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酵素呈色,,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果
原理:針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗ti分別作為固相抗ti和酶標抗ti,,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結(jié)合物。
2. 間接法
間接法常用于檢測抗ti,,一般的操作步驟為:
a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,,完成后洗去多余的抗原。
b. 加入待測檢體,,檢體中若含有待測的一次抗ti,,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結(jié)。
c. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗ti,,與待測的一次抗ti鍵結(jié),。
d. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酶呈色,,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),,以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗ti的含量。
原理:利用酶標記的抗抗ti以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗ti,。
3. 競爭法
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:
a. 將具有專一性的抗ti固著于塑膠孔盤上,,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測檢體,,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結(jié)
c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗ti進行專一性鍵結(jié),,由于塑膠孔盤上固著的抗ti數(shù)量有限,,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗ti就越少,,亦即,,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗ti鍵結(jié),即所謂競爭法之由來,。
d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,,加入酶底物使酶呈色,當檢體中抗原量越多,,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,,顯色也就越淺。
e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗ti的抗原,,或是不易得到足夠的純化抗ti以固著于孔盤上時,,一般會考慮使用競爭法ELISA。
標本要求 :
1.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間控
制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于
標準品孔孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍) 后再測定,計算時請
后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
訂購說明:
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