大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒

Elisa試劑盒系列：

ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit,、酶聯(lián)免疫試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒,、酶免試劑盒等,，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等,。

ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,，得到科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣,，尤其是國內生化領域的長足發(fā)展,。

Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強,，重復性好的實驗診斷方法,。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,，操作簡便,，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中,。

可檢測種屬

（人,，小鼠，大鼠,，植物,，魚,，蝦，蟹,，牛,，羊，狗,，貓,，微生物，細胞,，土壤等動植物）

可以檢測樣為

（血清,，血漿，唾液,，尿液,，組織，細胞上清,，裂解液等）

產品檢測目的：

樣本水平表達（定量檢測,，定性檢測，酶活性檢測）

規(guī)格：96T 可以檢測89個樣  48T可以檢測41個樣

備注：6個標準一個空白對照

有效期：6個月 保存2-8°C

大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒

elisa試劑盒的優(yōu)點：

一,、高效,、靈敏、特異的抗體,；

二,、穩(wěn)定的重復性和可靠性；

三,、吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高的固相載體,；

四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型,；

五、最大限度的節(jié)省實驗經費,。

常用方法及原理如下：

1. 夾心法：

夾心法常用于檢測大分子抗原,，一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗體固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體,，檢體中若含有待測的抗原,，則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

c. 洗去多余待測檢體,，加入另一種對抗原專一的一次抗體，與待測抗原進行鍵結

d. 洗去多余未鍵結一次抗體,，加入帶有酶的二次抗體,，與一次抗體鍵結

e. 洗去多余未鍵結二次抗體，加入酶底物使酵素呈色,，以肉眼或儀器讀取呈色結果

原理：針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。

2. 間接法

間接法常用于檢測抗體,，一般的操作步驟為：

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,，完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待測檢體,，檢體中若含有待測的一次抗體,，則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。

c. 洗去多余待測檢體,，加入帶有酶的二次抗體,，與待測的一次抗體鍵結。

d. 洗去多余未鍵結二次抗體,，加入酶底物使酶呈色,，藉儀器（ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量,。

原理：利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,。

3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制，一般用于檢測小分子抗原,，其操作步驟為：

a. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

c. 加入帶有酶的抗原,，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結,，由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限，因此當檢體中抗原的量越多,，則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少,，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結,，即所謂競爭法之由來,。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色,，當檢體中抗原量越多,，代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺。

e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時,，一般會考慮使用競爭法ELISA。

原理：將特異性抗體包被于固相載體表面,，經洗滌后分成兩組：一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液,，另一組只加酶標記抗原，經孵育洗滌后加底物顯色,，這兩組底物降解量之差,，即為所要測定的未知抗原的量。

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