檢測(cè)原理

試劑盒采用雙抗原一-步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 。往預(yù)先包被病毒性腹瀉病毒抗ti的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗原，經(jīng)過(guò)溫育并徹di洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在suan的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450NM波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值) ,，與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的存在與否。

樣品收集,、處理及保存方法

1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

3.細(xì)胞上清液: 3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn) 離心10分鐘取上清,。

5.保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存于-20°C,， 避免反

復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：最di檢測(cè)濃度小于0.1 U/mL,。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。

5. 貯藏：2-8℃,，避光防潮保存。

6. 有效期：6個(gè)月

人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒

樣品收集,、處理及保存方法

1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

3.細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。

5.保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)：

1）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。

2）實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。

3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。

4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。

6）洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。

7）底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。

8）加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。

9）按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

深圳瑞清生物信息科技有限公司經(jīng)過(guò)數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā),、經(jīng)營(yíng)為一體的專業(yè)化生物工程公司,。公司具有完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)開(kāi)發(fā)平臺(tái),，成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),，熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),，結(jié)合公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì)，可以有效的保證公司產(chǎn)品強(qiáng)的穩(wěn)定性和高的準(zhǔn)確性,，同時(shí)又具有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,。 公司主營(yíng)ELISA試劑盒，目前可以提供生化試劑,、分子生物學(xué)試劑及試劑盒,，各種抗體及免疫學(xué)試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材等多門類上萬(wàn)種產(chǎn)品,，產(chǎn)品涉及分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,。