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自然界中發(fā)現(xiàn)的蛋白質大小從5kDa到400kDa不等,。蛋白質水解過程將蛋白質切成較短片段，即肽段,，蛋白質水解是肽質譜鑒定分析之前至關重要的一步,，是蛋白質鑒定和表征、生物標記物的發(fā)現(xiàn)成功進行的基礎,。盡管質譜可以研究完整的蛋白質,，但是較小的肽更容易進行蛋白質鑒定。且可提高蛋白質的覆蓋率,，因為蛋白質覆蓋率由于溶解性和異質性可能會降低,。因此，很常見的蛋白質組學方法往往會利用位點特異性酶切位點來產生較小的多肽片段,。質量較小的肽段更容易通過高效液相色譜（HPLC）和HPLC偶聯(lián)質譜進行分離和表征,。

百泰派克基于質譜的蛋白鑒定示例

BTP-蛋白質水解服務

百泰派克生物科技提供兩種水解蛋白質的方法：（1）凝膠內水解（聚丙烯酰胺凝膠基質中的蛋白質水解）；（2）溶液內水解（蛋白質在氯仿/甲醇中沉淀,，然后在尿素中再溶解后進行）,。通過一維或二維凝膠電泳分離的蛋白質，可直接在凝膠內進行水解,，凝膠內水解,，有效且可重現(xiàn)好，但比較費力費時,。相較于凝膠內水解,，溶液內水解方法更省力,，所需的時間較少，但溶液內水解的蛋白,，蛋白的再溶解度低,，可能會導致一定的樣品損失。

蛋白質水解的流程

百泰派克生物科技可同時提供凝膠內水解和溶液內水解兩種蛋白質水解相關服務,。蛋白質水解的工作流程包括：

1. 制備裂解液,；
2. 溶液內或凝膠內進行酶切;
3. 使用離液劑（如尿素和胍）使蛋白質變性；
4. 使用DTT還原二硫鍵,；
5. 使用碘乙酸或碘乙酰胺將半pang氨suan烷基化,；
6. 去除試劑和交換緩沖液；
7. 在適當?shù)膒H和溫度下,，用胰蛋baimei或其他蛋白酶在碳酸氫銨緩沖液中過夜變性約18小時；
8. 加入酸類物質終止酶切,。
9. 蛋白質富集/清洗,。

蛋白質水解的工作流程

樣品要求
百泰派克生物科技可處理各種類型的樣本，包括但不限于：

天然來源的蛋白質,；
重組來源的融合蛋白和標記蛋白,；
不同亞型的抗體；
膜蛋白及其他,。

蛋白質酶切的優(yōu)點

• 靈活性：我們提供凝膠內和溶液內水解兩種蛋白質水解策略,；
• 高準確性和覆蓋范圍：我們的水解服務可以大大提高質譜分析的準確性和覆蓋范圍。
• 應用廣泛：可促進蛋白質的鑒定和表征,，發(fā)現(xiàn)疾病的生物標志物,，并有助于理解生物學過程。
• 完整的蛋白質組學服務：我們提供完整的蛋白質組學服務,，涵蓋蛋白質組學分析的整個過程,，可對水解后的樣品進行分析測定，一站式為您解決組學問題,。