蛋白質(zhì)免疫印跡和電轉(zhuǎn)移服務(wù)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

電泳分離的蛋白質(zhì)從凝膠基質(zhì)轉(zhuǎn)移或“印跡"到膜（通常是硝酸纖維素或PVDF）上,，然后在膜表面進(jìn)行基于抗體的后續(xù)檢測(cè),，稱為蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot或immunoblotting）,。百泰派克生物科技提供蛋白質(zhì)免疫印跡分析服務(wù)，蛋白質(zhì)免疫印跡法通過(guò)高選擇性和高敏感的抗體-抗原相互作用,，可用于從復(fù)雜蛋白質(zhì)混合物中檢測(cè)特定的目標(biāo)蛋白質(zhì),，例如組織勻漿或細(xì)胞提取物等。所得數(shù)據(jù)可用于對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行定性和半定量分析,。

蛋白免疫印跡是一種廣泛使用的蛋白質(zhì)分析技術(shù),，可用于檢測(cè)組織勻漿或提取物樣品中的特定蛋白質(zhì)。蛋白免疫印跡法使用凝膠電泳法分別通過(guò)3-D結(jié)構(gòu)和多肽鏈的長(zhǎng)度對(duì)天然蛋白質(zhì)及變性蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,，分離后的蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)移到膜（通常是硝酸纖維素膜或PVDF）上,，zuì后在膜上用對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)具有特異性的抗體進(jìn)行特異性識(shí)別。Western Blot廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),、生物化學(xué),、免疫遺傳學(xué)和其他分子生物學(xué)領(lǐng)域。 在蛋白免疫印跡分析中,，首先利用各種方法，如和IEF,，通過(guò)等電點(diǎn)（pI）,、分子量、電荷或這些因素的組合,，從凝膠電泳中分離出樣品中的蛋白質(zhì),。常用SDS-PAGE進(jìn)行分離，因?yàn)樗械鞍踪|(zhì)都被溶解在凝膠內(nèi),，沿相同方向遷移,，結(jié)合SDS的變性作用，抗原表位更容易被識(shí)別,。 凝膠電泳分析之后,，將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移至由硝酸纖維素或聚偏二氟乙烯（PVDF）制成的膜上，以用于抗體檢測(cè),。PVDF膜與蛋白質(zhì)的結(jié)合能力比硝酸纖維素膜更高,，但硝酸纖維素膜與較小蛋白質(zhì)結(jié)合的更好。轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì)的主要方法是電印跡，電印跡法使用電流將蛋白質(zhì)從凝膠中拉入PVDF或硝酸纖維素膜中,。電泳轉(zhuǎn)移方法包括：濕法轉(zhuǎn)印,、半干轉(zhuǎn)印和半濕轉(zhuǎn)印。如果使用等電點(diǎn)聚焦進(jìn)行蛋白質(zhì)分離,，那么利用壓力轉(zhuǎn)印擴(kuò)散來(lái)轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì)更為有效,。 轉(zhuǎn)印過(guò)程從一個(gè)小時(shí)（半干轉(zhuǎn)印）到過(guò)夜轉(zhuǎn)?。穹ㄞD(zhuǎn)?。瑫r(shí)間不等,。轉(zhuǎn)印完成后,，膜的自由結(jié)合位點(diǎn)被蛋白質(zhì)混合物封閉，因此后續(xù)抗體檢測(cè)不會(huì)受到干擾,。即可對(duì)轉(zhuǎn)印到膜上的蛋白質(zhì)進(jìn)行抗體檢測(cè),。包含蛋白質(zhì)的膜首先與一抗進(jìn)行孵育，然后再由識(shí)別一抗的二抗結(jié)合后進(jìn)行檢測(cè),。二抗一般帶有報(bào)告基團(tuán),，并具有很高的靈敏度。 zuì靈敏的檢測(cè)方法是使用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（ECL）：通過(guò)抗體-辣根結(jié)合物對(duì)一抗進(jìn)行識(shí)別,。使用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光的特殊變體,，可檢測(cè)低至1 pg的蛋白條帶。 蛋白免疫印跡還可用于追蹤,，與磷酸化蛋白質(zhì)的所有亞型相結(jié)合的抗體會(huì)在二維凝膠上呈現(xiàn)“念珠狀"外觀,。也可用于鑒定免疫共沉淀產(chǎn)生的復(fù)合物中的已知蛋白和未知蛋白，只要目標(biāo)蛋白質(zhì)在凝膠中,，就可以通過(guò)考馬斯亮藍(lán)染色,，從凝膠中切出相應(yīng)的斑點(diǎn)，進(jìn)行后續(xù)質(zhì)譜鑒定,。

SDS-PAGE

蛋白質(zhì)的磷酸化

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一,、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù),，包括對(duì)蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析,，N端測(cè)序，C端測(cè)序和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務(wù),。對(duì)于未知理論序列的蛋白質(zhì)，提供基于從頭測(cè)序法的蛋白質(zhì)從頭測(cè)序服務(wù),，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二、蛋白質(zhì)組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,，提供定量蛋白質(zhì)組學(xué),、靶向蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué),、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù),。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù),，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標(biāo)記方法,，適用于分析組織、細(xì)胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)先進(jìn)，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高,，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷,、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別,。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo),。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質(zhì),、多肽,、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA,、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué),、代謝組學(xué),、生物藥物表征、單細(xì)胞分析,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式,、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái),，滿足您一站式服務(wù)需求,；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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