生物樣本分析主要考慮的問題包括濃度低、干擾多,、取樣少,、個體差異大、應(yīng)視樣品類型,、目標(biāo)分析物的性質(zhì)選擇合適的的樣品處理方法,。
生物樣本預(yù)處理方法有:
一、蛋白沉淀法(PPT)
二,、液液萃取法(LLE)
三,、固相萃取法(SPE)
四、其他預(yù)處理方法:超濾膜過濾,、稀釋,、柱切換、衍生化,、免疫親和萃?。↖AC)、酸或者酶水解,;
一,、蛋白沉淀法(PPT)
蛋白沉淀法(PPT)通過加入有機試劑、酸堿性試劑,、中性鹽和酶等蛋白沉淀劑,,是蛋白質(zhì)變性、達(dá)到除雜效果。
優(yōu)點:具有操作簡單,、便捷,、經(jīng)濟等特點。
缺點:大量樣品導(dǎo)致多次操作,,耗時長,,效率低,而且蛋白沉淀后的樣品凈化程度較低,,導(dǎo)致基質(zhì)效應(yīng),,目標(biāo)物響應(yīng)低。
適用范圍:適合樣品量少的極性小分子化合物,。
二,、液液萃取法(LLE)
液液萃取法(LLE)采用與水互不相溶的有機溶劑,將目標(biāo)物從水相提取至有機相的方法,。
優(yōu)點:液液萃取法(LLE)適合非極性至中等極性的分析物,,具有富集濃縮效果,減少基質(zhì)效應(yīng),,成本低,,方法易轉(zhuǎn)移,已開發(fā),。
缺點:不適用于親水極性物質(zhì),,操作中易污染,耗時較長,。
適用范圍:需要根據(jù)分析物性質(zhì),,考慮有機溶劑特性、體積,、pH對提取效果影響,;宜選擇對分析物溶解度大、沸點低,、易濃縮,、與水不互溶、無毒,、穩(wěn)定,、不易乳化的溶劑。
三,、固相萃取法(SPE)
SPE利用小柱不同填料類型,,實現(xiàn)正相、反相,、離子交換等等不同的分離模式,,選擇性的保留分析物而使干擾物流出,,或反之,達(dá)到凈化目的,。
優(yōu)點:適用的生物樣本范圍廣,,可富集痕量樣本分析。
缺點:操作繁瑣,,耗時長,成本高,,需要豐富的操作技巧,。
適用范圍:適用于從極性到非極性生物樣本多種類型的生物樣本,可富集痕量樣本分析,。
96孔正壓固相萃取儀
以上三種是生物樣本常見的預(yù)處理方法,,萊奧96孔固相萃取儀可支持蛋白沉淀板(PPT)、液液萃取板(LLE),、固相萃取板(SPE),,可同時操作96個樣本,簡化操作步驟,,縮短萃取時間,,通過氣動控制,保障很好的平行性和回收率,,排除因人員操作誤差而導(dǎo)致的結(jié)果不準(zhǔn)確,。
四、 其他預(yù)處理辦法:
如稀釋法,,樣品經(jīng)一定體積的稀釋液稀釋后直接進樣,。
優(yōu)點:操作簡單,耗時少,,成本低
缺點:不適用濃度低的樣本,,基質(zhì)效果明顯。
使用范圍:適用尿液,、淚液,、腦脊液等比較干凈樣本。
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