生物樣本分析主要考慮的問題包括濃度低、干擾多,、取樣少,、個體差異大、應視樣品類型,、目標分析物的性質選擇合適的的樣品處理方法,。
生物樣本預處理方法有:
一,、蛋白沉淀法(PPT)
二、液液萃取法(LLE)
三,、固相萃取法(SPE)
四,、其他預處理方法:超濾膜過濾、稀釋,、柱切換,、衍生化、免疫親和萃?。↖AC),、酸或者酶水解;
一,、蛋白沉淀法(PPT)
蛋白沉淀法(PPT)通過加入有機試劑,、酸堿性試劑、中性鹽和酶等蛋白沉淀劑,,是蛋白質變性,、達到除雜效果。
優(yōu)點:具有操作簡單,、便捷,、經濟等特點。
缺點:大量樣品導致多次操作,,耗時長,,效率低,而且蛋白沉淀后的樣品凈化程度較低,,導致基質效應,,目標物響應低。
適用范圍:適合樣品量少的極性小分子化合物,。
二,、液液萃取法(LLE)
液液萃取法(LLE)采用與水互不相溶的有機溶劑,將目標物從水相提取至有機相的方法,。
優(yōu)點:液液萃取法(LLE)適合非極性至中等極性的分析物,,具有富集濃縮效果,減少基質效應,,成本低,,方法易轉移,已開發(fā),。
缺點:不適用于親水極性物質,,操作中易污染,耗時較長。
適用范圍:需要根據分析物性質,,考慮有機溶劑特性,、體積、pH對提取效果影響,;宜選擇對分析物溶解度大,、沸點低、易濃縮,、與水不互溶,、無毒、穩(wěn)定,、不易乳化的溶劑,。
三、固相萃取法(SPE)
SPE利用小柱不同填料類型,,實現正相,、反相、離子交換等等不同的分離模式,,選擇性的保留分析物而使干擾物流出,,或反之,達到凈化目的,。
優(yōu)點:適用的生物樣本范圍廣,,可富集痕量樣本分析。
缺點:操作繁瑣,,耗時長,,成本高,需要豐富的操作技巧,。
適用范圍:適用于從極性到非極性生物樣本多種類型的生物樣本,,可富集痕量樣本分析。
96孔正壓固相萃取儀
以上三種是生物樣本常見的預處理方法,,萊奧96孔固相萃取儀可支持蛋白沉淀板(PPT),、液液萃取板(LLE)、固相萃取板(SPE),,可同時操作96個樣本,簡化操作步驟,,縮短萃取時間,,通過氣動控制,保障很好的平行性和回收率,,排除因人員操作誤差而導致的結果不準確,。
四、 其他預處理辦法:
如稀釋法,樣品經一定體積的稀釋液稀釋后直接進樣,。
優(yōu)點:操作簡單,,耗時少,成本低
缺點:不適用濃度低的樣本,,基質效果明顯,。
使用范圍:適用尿液、淚液,、腦脊液等比較干凈樣本,。
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