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樣本處理及要求：

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可,，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

樣品保存：樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測的可保存于4℃,，若不能及時檢測,，請按一次使用量分裝,，凍存于-20℃（1個月內(nèi)檢測），或-80℃（6個月內(nèi)檢測）,，避免反復(fù)凍融,，標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測,。

二.   96T人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）,；

②陰性對照 0.5mL；

③陽性對照 0.5mL,；

④檢測抗體-HRP 10mL,；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL；

⑥稀釋液 6mL,；

⑦底物 A 6mL,；

⑧底物 B 6mL；

⑨終止液 6mL,；

⑩封板膜 2 張,；說明書 1 份；自封袋 1 個.

備注：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋,，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水,。

三.   使用注意事項(xiàng)：

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,，這屬于正常現(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用,。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存,。

3.  預(yù)處理后的樣本無需稀釋,，直接取50μL加樣即可。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

四. 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷

1.  試驗(yàn)有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00,；

               陰性對照孔OD值平均值≤0.15,。

2.  臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off）,，樣品為陽性