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一.   實(shí)驗(yàn)原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被黃熱病毒的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗原,，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中黃熱病毒抗體（YFV-Ab）的存在與否,。

二.  人黃熱病毒抗體(YFV-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒組成及其配置：

三.   常見問題解答：

1.     【高背景或陰性對(duì)照值偏高】

可能的原因：陰性對(duì)照孔被陽性對(duì)照或樣品污染；抗體非特異性結(jié)合,；酶結(jié)合物過濃,；孵育溫度過高；底物在使用前曝光,；讀板前停留時(shí)間過長(zhǎng)

上海軒澤康生物為您提供解決方案：洗滌時(shí)勿將洗液溢出孔外,；建議更換封閉液；檢查酶結(jié)合物是否按照說明書規(guī)定稀釋,；檢查孵育箱的溫度是否正確,、穩(wěn)定；應(yīng)保存在暗處,、避光,；加終止液后3分鐘內(nèi)讀數(shù)。

2.     【陽性對(duì)照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 試劑未平衡至室溫;檢測(cè)體積偏小;孵育時(shí)間過短;底物受污染;樣本中有抑制劑,。

上海軒澤康生物為您提供解決方案：實(shí)驗(yàn)開始前,，將試劑盒從冰箱內(nèi)取出平衡至室溫（20-25℃）；檢查移液器吸液通道是否堵塞,；使用計(jì)時(shí)器,，準(zhǔn)確孵育時(shí)間；使用新配置的試劑,，重新實(shí)驗(yàn),；疊氮鈉會(huì)抑制HRP酶的活性。

四. 人黃熱病毒抗體(YFV-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)

1.  試劑盒保存在2-8℃,，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,，密封（低溫干燥）保存,。

3.  預(yù)處理后的樣本無需稀釋，直接取50μL加樣即可,。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻,。