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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 植物可溶性多糖(SSP)ELISA檢測試劑盒
上海軒澤康生物有限公司擁有各式各樣的ELISA檢測試劑盒共市場選擇如:人ELISA試劑盒,、豚鼠ELISA試劑盒、兔ELISA試劑盒,、豬ELISA試劑盒,、小鼠ELISA試劑盒、植物ELISA試劑盒,、昆蟲ELISA試劑盒,、大鼠ELISA試劑盒等等,總有一款適合使用需求,。
檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被可溶性多糖(SSP)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的可溶性多糖(SSP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
樣品收集、處理及保存方法:
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑,。
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,。
3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請1000 x g離心20分鐘,,取上清即可檢測。
4. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
植物可溶性多糖(SSP)ELISA檢測試劑盒操作注意事項:
1. 使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用,。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度,。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻,。
注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、100,、200,、400、800,、1600 mg/mL
植物可溶性多糖(SSP)ELISA檢測試劑盒使用指南:
步驟一:從冷藏環(huán)境中取出試劑盒,,室溫放置30分鐘以確保所有試劑穩(wěn)定。
步驟二:根據(jù)待測樣本數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條密封放回冰箱,。
步驟三:分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔,、待測樣品孔(為避免實驗誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔),。
步驟四:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白孔中,,空白對照孔加入50ul的蒸餾水。齊譽(yù)孔加入50ul的待測樣本,。
步驟五:標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測樣本孔各孔加入100ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
步驟六:酶標(biāo)板用封板膜密封后放入濕盒于37℃恒溫孵育1小時,。
步驟七:洗板,。用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15~30秒,,充分清洗酶標(biāo)板5次,,用吸水紙拍干
步驟八:各孔分別加入底物A、底物B 50ul(不用吹打)
步驟九:37℃避光反應(yīng)10-15分鐘,,加入50ul終止液
步驟十:在450nm波長讀取各孔的OD值
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