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上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,,種屬標本齊全,,有zhuan門針對人血清、血漿,、全血,、分泌物、尿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒,;另有針對各種動物(鼠,、兔、山羊,、牛,、豬、犬,、雞,、馬、猴,、魚),、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒。
小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒樣品收集,、處理方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清,。
關于血清樣本注意事項:
大部分ELISA檢測均以血清為標本,。血清標本可按常規(guī)方法采集,應注意避免溶血,,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,,以HRP未標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異顯色,。此外還應避免細菌污染,,因為菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應,。血清標本宜在新鮮時檢測,。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,,在間接法ELISA中可使本底加深,。
血清的采集、處理以及保存如下:
① 真空采集新鮮血液,,加入無菌試管中,;
② 采血后室溫靜置1小時;
③ 將采集血液用離心機4℃,,2500rpm離心10分鐘
④ 取上清,,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時內檢測存于2-8℃;1個月內檢測存于-20℃,;長期檢測可存于-80℃,,可放置保存6個月)
備注:
1. (96T/48T)打開包裝后請及時檢查所有物品是否齊全。
2. 標準品濃度依次為:0,、10,、20、40,、80,、160 pg/mL
3. 樣本應避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
檢測前準備工作:
1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,,平衡至室溫,。
2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,,屬于正?,F(xiàn)象;放置室溫,,輕搖均勻,,待結晶溶解后再配置洗滌液??蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,,未用完的放回4℃
3. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。
小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加稀釋液40μL,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值,。
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