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當(dāng)前位置:> 供求商機> 小鼠成纖維細胞生長因子23ELISA檢測試劑盒
上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,,種屬標(biāo)本齊全,,有zhuan門針對人血清,、血漿、全血,、分泌物,、尿液、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠,、兔,、山羊、牛,、豬,、犬、雞,、馬,、猴、魚),、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,。
小鼠成纖維細胞生長因子23ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。
關(guān)于血清樣本注意事項:
大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本,。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP未標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異顯色,。此外還應(yīng)避免細菌污染,,因為菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,。如在冰箱中保存過久,,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深,。
血清的采集,、處理以及保存如下:
① 真空采集新鮮血液,加入無菌試管中,;
② 采血后室溫靜置1小時,;
③ 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10分鐘
④ 取上清,,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時內(nèi)檢測存于2-8℃,;1個月內(nèi)檢測存于-20℃;長期檢測可存于-80℃,,可放置保存6個月)
樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被成纖維細胞生長因子23(FGF-23)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的成纖維細胞生長因子23(FGF-23)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度,。
小鼠成纖維細胞生長因子23ELISA檢測試劑盒組成及其配置:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0,、25、50,、100,、200、400 pg/mL
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