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上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,，種屬標(biāo)本齊全,，有zhuan門(mén)針對(duì)人血清、血漿,、全血,、分泌物、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠,、兔,、山羊、牛,、豬,、犬、雞,、馬,、猴、魚(yú)）,、植物土壤以及藥殘類(lèi)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒,。

小鼠幾丁質(zhì)酶3類(lèi)蛋白3(CHIL3)ELISA試劑盒樣品收集、處理方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2.  血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。

關(guān)于血清樣本注意事項(xiàng)：

大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,，應(yīng)注意避免溶血,，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP未標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異顯色,。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w中可能含有內(nèi)源性HRP,，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng),。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過(guò)久,，其中的可發(fā)生聚合,，在間接法ELISA中可使本底加深。

血清的采集,、處理以及保存如下:

①    真空采集新鮮血液,，加入無(wú)菌試管中；

②    采血后室溫靜置1小時(shí)；

③    將采集血液用離心機(jī)4℃,，2500rpm離心10分鐘

④    取上清,，分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時(shí)內(nèi)檢測(cè)存于2-8℃；1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)存于-20℃,；長(zhǎng)期檢測(cè)可存于-80℃,，可放置保存6個(gè)月）

樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被幾丁質(zhì)酶3類(lèi)蛋白3（CHIL3）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的幾丁質(zhì)酶3類(lèi)蛋白3（CHIL3）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

小鼠幾丁質(zhì)酶3類(lèi)蛋白3(CHIL3)ELISA試劑盒組成及其配置：

注：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0,、12.5、25,、50,、100、200 pg/mL