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上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,,種屬標本齊全,,有zhuan門針對人血清、血漿,、全血,、分泌物、尿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠,、兔,、山羊、牛,、豬,、犬、雞,、馬,、猴、魚),、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,。
小鼠水通道蛋白4(AQP4)ELISA檢測試劑盒現(xiàn)貨樣品收集、處理方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。
關(guān)于血清樣本注意事項:
大部分ELISA檢測均以血清為標本,。血清標本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP未標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異顯色,。此外還應(yīng)避免細菌污染,,因為菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。血清標本宜在新鮮時檢測,。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,,在間接法ELISA中可使本底加深,。
血清的采集、處理以及保存如下:
① 真空采集新鮮血液,加入無菌試管中,;
② 采血后室溫靜置1小時,;
③ 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10分鐘
④ 取上清,,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時內(nèi)檢測存于2-8℃,;1個月內(nèi)檢測存于-20℃;長期檢測可存于-80℃,,可放置保存6個月)
樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測原理:小鼠Elisa試劑盒的檢測原理主要是根據(jù)抗原或者抗體的固定化以及抗原或者抗體酶標記作用,,再加入酶底物后,,使其發(fā)生顯著的顏色反應(yīng)。再根據(jù)顏色反應(yīng)來對有效成分進行定量定性分析,。針對于結(jié)合物的保存,,酶和抗體都是活性物質(zhì),容易完成失活現(xiàn)象,,應(yīng)該變成高濃度并在冰箱中保存一年方可更穩(wěn)定一些,。
小鼠水通道蛋白4(AQP4)ELISA檢測試劑盒現(xiàn)貨操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,,再加稀釋液40μL;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值,。
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