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上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,,種屬標本齊全,,有zhuan門針對人血清、血漿,、全血,、分泌物、尿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒,;另有針對各種動物(鼠,、兔、山羊,、牛,、豬、犬,、雞,、馬、猴,、魚),、植物土壤以及藥殘類酶聯免疫吸附測定試劑盒。
樣品收集,、處理方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉離心10分鐘取上清。
關于血清樣本注意事項:小鼠干擾素誘導蛋白10(IP10)ELISA試劑盒
大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,,應注意避免溶血,,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP未標記的ELISA測定中,,溶血標本可能會增加非特異顯色,。此外還應避免細菌污染,因為菌體中可能含有內源性HRP,,也會產生假陽性反應,。血清標本宜在新鮮時檢測。如在冰箱中保存過久,,其中的可發(fā)生聚合,,在間接法ELISA中可使本底加深。
血清的采集,、處理以及保存如下:
① 真空采集新鮮血液,,加入無菌試管中;
② 采血后室溫靜置1小時,;
③ 將采集血液用離心機4℃,,2500rpm離心10分鐘
④ 取上清,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時內檢測存于2-8℃,;1個月內檢測存于-20℃,;長期檢測可存于-80℃,可放置保存6個月)
樣本應避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
檢測原理:小鼠Elisa試劑盒的檢測原理主要是根據抗原或者抗體的固定化以及抗原或者抗體酶標記作用,再加入酶底物后,,使其發(fā)生顯著的顏色反應,。再根據顏色反應來對有效成分進行定量定性分析。針對于結合物的保存,,酶和抗體都是活性物質,,容易完成失活現象,應該變成高濃度并在冰箱中保存一年方可更穩(wěn)定一些,。
小鼠干擾素誘導蛋白10(IP10)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加稀釋液40μL,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內,,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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