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檢測(cè)前準(zhǔn)備工作：

1. 請(qǐng)?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫,。2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,，屬于正常現(xiàn)象,；放置室溫,，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液,?？蓪?20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml 工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20 稀釋,，即1份20×洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水,。

實(shí)驗(yàn)原理：試 劑 盒 采 用 雙 抗 體二步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人磷酸化α-突觸核蛋白(p-α-SYN)捕獲抗體包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品孵育，加入生物化抗體進(jìn)行抗體生物su化,，經(jīng)過溫育后加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人磷酸化α-突觸核蛋白（p-α-SYN）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）,，計(jì)算樣品濃度。

上海軒澤康生物有限公司人(p-α-SYN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 定量提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，質(zhì)量可靠,，產(chǎn)品具有靈敏度高、效果穩(wěn)定等特點(diǎn),。需購買我司產(chǎn)品的新老客戶請(qǐng)聯(lián)系我司工作人員,。

操作步驟：

1．從室溫平衡 60min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃,。

2．設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL。

3．樣本孔中加入待測(cè)樣本 50μL,；空白孔不加,。樣本如需稀釋，按照要求用試劑盒配套稀釋液稀釋樣本。

4．每孔加入生物su標(biāo)記抗體50μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 30min；標(biāo)準(zhǔn)孔空白孔不加,！

5．棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置 1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。

6．除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

7．棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。

8．每孔加入底物 A,、B 各50μL，37℃避光孵育15min,。

9．每孔加入終止液 50μL,，15min 內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值,。

我司ELISA檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì) ：人(p-α-SYN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 定量

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