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一.產品介紹:植物ATP結合轉運蛋白酶(ABC)ELISA試劑盒
【產品規(guī)格】:96T/盒:可檢測90個樣;48T/盒:可檢測42個樣,。
【準確性】:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,,大于等于0.9900。
【靈敏度】:zui低檢測濃度小于10.0 U/L,。
【特異性】:不與其它可溶性結構類似物交叉反應,。
【重復性】:板內、板間變異系數均小于15%
【適用范圍】:此試劑盒僅用于科學研究,,禁止用于臨床,。
二. 實驗需自備器材:
1、450nm酶標儀,。
2,、自動洗板機。
3,、37℃恒溫箱,。
4、系列可調節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器,。
5,、干凈的試管和Eppendof管。
6,、用去離子水將25X洗滌緩沖液稀釋25倍,成1X洗滌緩沖液,。
三. 樣品收集、處理及保存方法:
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑,。
2. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,。
3. 植物萃取液或其它相關樣本:請1000 x g離心20分鐘,,取上清即可檢測,。
(植物處理方案)
1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨,,如無液氮,,剪碎,玻璃勻漿器研磨也可,;
2,、 加入樣品體積9倍(鮮重:勻漿液體積)的提取液(0.1mmol PH7.4 PBS ), 4℃浸提2h;
3,、 請于4℃ ,,3000rpm,離心10min,,收集上清,;
4、 取上清檢測,。
注:標本均應密封保存,,短期內使用(1周左右),可4度保存,;若樣本收集與實驗時間相隔較長,,務必保存在-20或-80度,盡量不要超過半年,,同時避免反復凍融,。
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五.檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被ATP 結合轉運蛋白酶(ABC)抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的ATP 結合轉運蛋白酶(ABC)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品活性,。
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