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一. 檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被ACC合成酶(ACS)抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ACC合成酶(ACS)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品活性。
二. 產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 | 土壤ACC合成酶(ACS)ELISA檢測試劑盒 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T/盒:可檢測90個樣本,; 48T/盒:可檢測42個樣本 |
檢測方法 | elisa酶聯(lián)免疫法 |
樣本類型 | 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑 |
產(chǎn)品用途 | 僅供科研實驗檢測,,不得用于臨床診斷,。 |
特色服務 | 免費代測,全程提供ELSIA實驗技術指導 |
供貨期 | 1-3天(現(xiàn)貨供應) |
三. 試劑盒組成及其配置:標準品(S0-S5)濃度依次為:0,、50、100,、200、400,、800 IU/ml
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
四. ELISA實驗操作步驟如下:土壤ACC合成酶(ACS)ELISA檢測試劑盒
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,,再加稀釋液40μL,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。
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