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一. 土壤幾丁質酶(chitinase)ELISA檢測試劑盒檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被幾丁質酶（chitinase）抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,，經過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的幾丁質酶（chitinase）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

二.試劑盒組成及其試劑配置：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、1.5,、3、6,、12,、24 U/L

三.土壤幾丁質酶(chitinase)ELISA檢測試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,，再加稀釋液40μL；空白孔不加,。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6.  每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL,，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

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