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實(shí)驗(yàn)室推薦人(α-GST)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加稀釋液40μL,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
實(shí)驗(yàn)室推薦人(α-GST)ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1) 為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,,上樣,、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽,。
2) 混合或重溶蛋白溶液時(shí),,盡量避免起沫。
3) 每次孵育時(shí),,請(qǐng)使用正確的封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
4) 終止液上板書匈奴應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃,;若孔內(nèi)有綠色,,則表明孔內(nèi)液體未混勻請(qǐng)充分混合。
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