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檢測原理:大鼠FIX酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被(FIX)抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的(FIX)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
實驗前的準備:
1) 確定試劑盒在有效期內
2) 仔細閱讀說明書,按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量,、體積)
3) 提前準備好所有實驗額外所需的設備(如離心機,、37℃恒溫箱、高精度加樣器及槍頭,、酶標儀等)
4) 標本制備要規(guī)范,,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份,。短期內無法實驗者注意低溫保存,。根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
5) 按說明書將所有試劑平衡至室溫,配制所需試劑,。嚴格按照說明書進行實驗步驟,。
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