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ALT酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒檢測前準(zhǔn)備工作：1. 請?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫,。2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,，屬于正常現(xiàn)象,；放置室溫,，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液,?？蓪?20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml 工作濃度的洗滌液，未用完的放回 4℃3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份 20×洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水,。試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被（ALT）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的（ALT）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度,。

ALT酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒的注意事項：

1） 充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果很重要,，在加液后請輕輕晃動整個96板孔，以保證混勻,。

2） TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬,，否則容易失效。

3） 加樣時請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,，一方面避免交叉污染,，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產(chǎn)生,。

4） 檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,，以確保檢測結(jié)果的可信度。

5） 洗滌過程非常重要,，洗滌不充分會下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大,。