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大鼠FⅤ酶聯(lián)免疫（ELISA）試劑盒（科研實(shí)驗(yàn)專用）操作步驟：步驟一：使用前將所有試劑平衡至室溫并充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫以免加樣時(shí)加入大量的氣泡產(chǎn)生加樣上的誤差。步驟二：根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。步驟三：【加樣】加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物,，素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻,，37攝氏度溫育45分鐘,。步驟四：【洗滌】甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液振蕩30秒,，甩去洗滌液用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作4次，也可以用洗板機(jī)洗滌,。步驟五：每孔加入100ul的HRP輕輕振蕩混勻37攝氏度溫育30分鐘,。步驟六：重復(fù)洗滌步驟,。步驟七：每孔加入底物A、B溶液各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37攝氏度溫育5分鐘，避免光照,。步驟八：取出酶標(biāo)板迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。步驟九：在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

備注：1. （96T/48T）打開包裝后請(qǐng)及時(shí)檢查所有物品是否齊全,。2.標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、30,、60,、120、240,、480 pg/ml3. 經(jīng)過(guò)大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直接取 50μL 樣本上樣即可,。當(dāng)有部分樣本值超過(guò)最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),，可用稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。大鼠FⅤ酶聯(lián)免疫（ELISA）試劑盒