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植物(COX)ELISA試劑盒檢測前準(zhǔn)備工作:
1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,,平衡至室溫,。
2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,;放置室溫,輕搖均勻,,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液,。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃
3. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。
植物(COX)ELISA試劑盒使用指南:
步驟一:從冷藏環(huán)境中取出試劑盒,室溫放置30分鐘以確保所有試劑穩(wěn)定,。
步驟二:根據(jù)待測樣本數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條密封放回冰箱。
步驟三:分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、空白孔,、待測樣品孔(為避免實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔),。
步驟四:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白孔中,空白對照孔加入50ul的蒸餾水,。齊譽孔加入50ul的待測樣本,。
步驟五:標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔各孔加入100ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外),。
步驟六:酶標(biāo)板用封板膜密封后放入濕盒于37℃恒溫孵育1小時,。
步驟七:洗板。用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置15~30秒,,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙拍干
步驟八:各孔分別加入底物A,、底物B 50ul(不用吹打)
步驟九:37℃避光反應(yīng)10-15分鐘,,加入50ul終止液
步驟十:在450nm波長讀取各孔的OD值
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