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上海軒澤康生物人乳頭瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒產(chǎn)品規(guī)格:96T/盒:可檢測(cè)90個(gè)樣本,。48T/盒:可檢測(cè)42個(gè)樣本。ELISA常用的方法有:雙抗體夾心法,、間接法,、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等??蓹z測(cè)樣本:細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、體液,、尿液,、血清血漿,、腦脊液胸腹水標(biāo)本等。特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng),。我司致力于為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)可靠的ELISA檢測(cè)試劑盒,產(chǎn)品種類包括心肌梗塞檢測(cè)ELISA試劑盒,、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)ELISA試劑盒,、胰島素ELISA試劑盒、免疫組化檢測(cè)ELISA試劑盒,、細(xì)胞凋亡ELISA試劑盒等,。
一. 96T試劑盒組成及其配置:
①微孔酶標(biāo)板( 12 孔×8 條);
②陰性對(duì)照 0.5mL,;
③陽(yáng)性對(duì)照 0.5mL,;
④檢測(cè)抗體-HRP 10mL;
⑤20×洗滌緩沖液 25mL,;
⑥稀釋液 6mL,;
⑦底物 A 6mL;
⑧底物 B 6mL,;
⑨終止液 6mL,;
⑩封板膜 2 張;說(shuō)明書(shū) 1 份,;自封袋 1 個(gè).
備注:20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
二. 人乳頭瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒操作步驟:
①?gòu)氖覝仄胶?20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回 4℃,。
②設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔,,陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照各 50μL,;
③待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL,再加稀釋液 40μL,;
④隨后陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min,。
⑤棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置 1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板),。
⑥每孔加入底物 A、B 各 50μL,,37℃避光孵育 15min,。
⑦每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),,在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD 值,。
三. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷:
①試驗(yàn)有效性:陽(yáng)性對(duì)照孔 OD 值平均值≥1.00; 陰性對(duì)照孔 OD 值平均值≤0.15,。
② 臨界值(Cut off)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
③陰性判斷:樣品 OD 值<臨界值(Cut off),,樣品為陰性
④陽(yáng)性判斷:樣品 OD 值>臨界值(Cut off),樣品為陽(yáng)性
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