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植物病程相關(guān)蛋白(PR)ELISA試劑盒使用注意事項:1. 本試劑盒取出的試劑在室溫條件下使用,,溶液應輕輕搖勻后使用。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,,這屬于正?,F(xiàn)象,加熱使結(jié)晶溶解后再配制,。2. 底物液使用前建議先行檢查,,若溶液顏色發(fā)藍則已失效,棄去,。3. 以上標準孔及待查樣品均建議做復孔,,每次測定應同時制作標準曲線。4. 板條開封后剩余板條要密封好,,保持板條干燥,。5. 不同批號的試劑盒組分不能混用。6.正確拿酶標板:不要接觸板的底部,,否則會影響度數(shù),。
植物病程相關(guān)蛋白(PR)ELISA試劑盒操作步驟:
【標準品的加樣】:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,。
【加樣】:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
【加酶】:每孔加入酶標試劑100μl,,空白孔除外。
【溫育】:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。
【配液】:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。
【洗滌】:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復5次,,拍干,。
【顯色】:每孔先加入底物溶液A 50μl,再加入底物溶液B 50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘。
【終止】:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
【測定】:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
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